论文部分内容阅读
目的:观察Ⅱ型糖尿病神经病理性疼痛(DNP)大鼠机械缩足反射阈值(MWT)、热缩足反射潜伏期(TWL)及脊髓、背根神经节(DRG)中MMP-9/2的表达,以及姜黄素对痛阈和MMP-9/2的表达的影响。探索姜黄素治疗Ⅱ型糖尿病神经病理性疼痛的相关机制。 方法:取36只SD大鼠(雄性,6周龄,体重120g-150g)分为两组,C组(n=9)和H组(n=27)。C组大鼠普通饲料喂养。H组大鼠适应性普通饲料饲养3天后,高脂高糖饲料喂养8周,继以单次小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35mg/kg诱导大鼠胰岛素抵抗,注射后3d测得大鼠血糖≥16.7mmol/l者符合Ⅱ型糖尿病大鼠标准。H组大鼠注射STZ14d后测得MWT、TWL低于基础值80%的大鼠符合Ⅱ型糖尿病神经病理性疼痛大鼠标准,将其随机分为3组(n=9):Ⅱ型糖尿病神经病理性痛组(DNP组)、姜黄素组(Cur组)(姜黄素100mg/kg/d)、溶剂组(SC组)(玉米油4ml/kg/d)。在姜黄素腹腔注射3、7、14d后测大鼠MWT与TWL,并取四组大鼠L4-6脊髓和背根神经节,使用蛋白免疫印迹法测定脊髓和背根神经节中MMP-9和MMP-2的表达。 结果: 1.大鼠体重、血糖、胰岛素浓度及胰岛素敏感指数的变化: 与C组相比,高脂高糖饲料喂养8周后H组大鼠血糖水平高于C组大鼠(C组:4.43±0.99mmol/l,H组:7.24±1.19mmol/l,P<0.05),但均未达到16.7mmol/l的糖尿病血糖水平标准;注射STZ3d后,H组大鼠H组大鼠血糖明显高于C组(C组:5.75±0.99mmol/l,H组:21.00±3.60mmol/l,P<0.05),达到16.7mmol/l的糖尿病血糖水平标准。喂养8周后H组大鼠空腹胰岛素浓度明显高于C组(C组:6.70±1.41mIU/l,H组:12.76±3.77mIU/l,P<0.05),胰岛素敏感指数低于C组(C组:-1.40±0.33,H组:-2.25±0.47,P<0.05)。 2.大鼠造模及姜黄素对MWT、TWL的影响造模前四组大鼠的MWT、TWL基础值无显著差异(C组:50.94±3.38、14.13±1.49; DNP组:50.97±3.13、14.13±2.03; Cur组:51.61±3.34、14.54±1.97; SC组:50.39±4.05、14.34±1.76)。 注射STZ后,与C组相比,造模后DNP组、Cur组、SC组各时间点MWT降低、TWL缩短(P<0.05);与DNP组相比,给姜黄素3、7、14天后, Cur组MWT降低、TWL缩短(P<0.05),Sc组和DNP组相比无统计学差异。 3.大鼠脊髓与DRG中MMP-2和MMP-9蛋白表达的变化腹腔注射姜黄素3、7、14天,与C组相比,DNP组脊髓MMP-2在3个时间点均出现表达上调(P<0.05)。与DNP组相比,Cur组经节中MMP-2表达下调(P<0.05)。SC组和DNP组相比差异无统计学差异。 腹腔注射姜黄素7、14天,与C组相比,DNP组DRG中MMP-2在这2个时间点均出现表达上调(P<0.05)。与DNP组相比,Cur组DRG中MMP-2表达下调(P<0.05)。SC组和DNP组相比差异无统计学差异。腹腔注射姜黄素3天,四组无统计学差异。 腹腔注射姜黄素7、14天,与C组相比,DNP组脊髓中MMP-9在这2个时间点均出现表达上调(P<0.05)。与DNP组相比,Cur组脊髓中MMP-9表达下调(P<0.05)。SC组和DNP组相比差异无统计学差异(P>0.05)。腹腔注射姜黄素3天,四组无统计学差异。 腹腔注射姜黄素3、7、14天,与C组相比,腹腔注射姜黄素3、7、14天,DNP组DRGMMP-9在3个时间点均出现表达上调(P<0.05)。与DNP组相比,Cur组DRG中MMP-9表达下调(P<0.05)。SC组和DNP组相比差异无统计学差异。 结论:Ⅱ型糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓和DRG中MMP-2和MMP-9表达明显升高,而腹腔注射姜黄素能够明显抑制这两种蛋白的表达,并有效缓解了糖尿病神经病理性疼痛,提示姜黄素减轻Ⅱ型糖尿病大鼠神经病理性痛的机制可能与抑制MMP-2和MMP-9的表达有关。