新生仔猪腹泻是养猪业面临的常发疾病之一,其高发病率和死亡率给养殖户造成了巨大的经济损失。产肠毒素大肠杆菌(ETEC)被认为是引发仔猪腹泻的重要病原,其致病性与毒力因子密切相关。由于针对ETEC毒力因子所设计的疫苗保护作用的局限性,抗生素被广泛用于兽医临床,防治仔猪腹泻,但是,抗生素的使用会加速临床耐药菌株的出现。同时,耐药基因也可以通过水平传播扩散到环境中,给人类健康造成潜在的威胁。本研究获得了吉林和河南地区腹泻仔猪大肠杆菌分离株的毒力基因、耐药谱和耐药基因的基本数据,并研究了ESBLs菌株的毒力和耐药基因的水平传播能力,为制定有针对性的疾病治疗和防控技术方案提供依据。本研究在2015年到2016年间,从吉林和河南地区采集了105份1~23日龄新生腹泻仔猪的直肠肛拭子样品,共获得了195株大肠杆菌。通过PCR鉴定,检出了eae、sta、stb、EAST1、F4和bfp共6种毒力基因,其中eae、sta、stb和F4的检出率均为1.5%(3/195),EAST1的检出率最高,吉林地区和河南地区的检出率均在31.7%以上。大肠杆菌的系统进化分群结果表明,分离株以A群和B1群为主,被认为有致病性的B2群和D群菌株的分离率为14.4%。195株分离株,多重耐药菌株为93.8%,经表型确认,共获得102株ESBLs菌株,河南地区ESBLs菌株的检出率(87.0%)远高于吉林地区(33.3%)。总体来说,两个地区分离株对庆大霉素、氨苄西林、哌拉西林、复方新诺明、莫西沙星和四环素的耐药率均在80.0%以上;对阿米卡星、头孢他啶、阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦和粘菌素的耐药率均在30.0%以下;对亚胺培南和美罗培南全敏感。SPSS统计分析结果表明,除了亚胺培南、美罗培南和四环素,河南地区分离株对其余18种抗生素耐药率显著高于吉林地区。两个地区ESBLs菌株均检出了bla CTX-M-1G和bla CTX-M-9G基因,河南地区ESBLs菌株的主要流行型是bla CTX-M-55和bla CTX-M-65,吉林地区的主要流行型是bla CTX-M-55和bla CTX-M-14。河南省地区除oqx AB和qnr S耐药基因检出率低于吉林省地区外,bla TEM-1、bla OXA-1、MCR-1、aac(6’)-Ib-cr和bla OXA-10耐药基因检出率均高于吉林省地区,而且检出了吉林省地区没有的qnr B和qeq A耐药基因。两个地区都没有检出bla CTX-M-2G、bla SHV、qnr A、qnr C和qnr D耐药基因。102株ESBLs菌株,通过接合转移实验获得了67株接合子,说明本实验分离株大部分bla CTX-M(bla CTX-M-1G和bla CTX-M-9G)位于可接合性的质粒上。获得接合子均为多重耐药菌株,这表明多种耐药基因随接合性质粒发生了共转移。头孢唑林、氨苄西林、哌拉西林、阿米卡星、庆大霉素、四环素、氯霉素、莫西沙星、多粘菌素、复方新诺明、环丙沙星和左氧氟沙星耐药表型均随头孢噻肟耐药表型发生了转移,且除了β-内酰胺类抗生素,氨基糖苷类抗生素(阿米卡星和庆大霉素)耐药表型与头孢噻肟耐药表型共转移频率最高。另外,本研究结果表明,EAST1和irp-2毒力基因与细菌耐药性有相关性,接合性质粒在毒力基因和耐药基因水平传播中发挥了重要作用。