pH和还原双响应性肝靶向半乳糖改性明胶/聚(β-氨基酯)复合微球的制备与性能研究

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明胶微球联合经动脉化疗栓塞技术被广泛用作抗肿瘤药物的运送载体用于治疗中晚期肝肿瘤的治疗,但由于载药明胶微球在靶点处主要依靠明胶载体的降解释放药物,导致释药缓慢、可控性差。即使是用于经动脉化疗栓塞法中,微球越难降解,越有利于栓塞效果,但技术中所用的化疗效果会因释药速度过慢导致药物浓度低而降低,甚至引发耐药性的发生。两者的矛盾使得改善传统明胶微球的释药性质显得尤为重要。明胶结构中有许多活泼基团如氨基、羟基、羧基等,能够利用这些反应活性高的基团将一些功能小分子共价连接至明胶微球上以使微球具有主动靶向的性质。去唾液酸糖蛋白受体(asi al ogly coprotein receptor, ASGR)只存在于哺乳动物肝细胞表面,能特异性的识别末端带有半乳糖或N-乙酰半乳糖基的糖蛋白。为利用ASGR介导的识别性使明胶微球具有肝靶向性,本论文经2-亚氨基-2-甲氧乙基-1硫代半乳糖苷为中间体对明胶改性获得半乳糖改性明胶(galactose modified gelatin, galG)。此外,基于肿瘤组织相比正常组织pH值更低而还原性谷胱甘肽(glutathione, GSG)的浓度更高的特性,先以N,N’-二甲基乙二胺和二(丙烯酰氧乙基)二硫醚为原料经迈尔克共轭加成聚合反应合成了每个重复单元中均有二硫键和两端为仲胺基的线性聚(p-氨基酯),以此聚合物和半乳糖改性明胶为两个单体构建一个新型的复合明胶微球。新型pH、还原双兀响应性肝靶向复合明胶微球(galG-PBAE microspheres)经乳化化学交联法制备,并以阿霉素盐酸盐(DOX-HC1)模型药物得到载DOX galG-PBAE复合明胶微球。所得载药微球为球形,载药量(drug loading content, DLC%)和包封率(drug loading efficiency, DLE%)分别为6.61%和66.08%,所测粒的径分布3-30μm表明制备的微球具备被动肝靶向性。体外释药试验表明降低介质pH值或加入还原剂二硫苏糖醇(dithiothreitol, DTT)均能显著促进药物释放。载DOX galG-PBAE复合明胶微球与HepG2细胞(表达ASGR)和Hela细胞(不表达ASGR)体外孵育实验证实微球具有主动肝靶向性。结果证明本论文设计并制备的galG-PBAE复合明胶微球不仅作为化疗方法中新型的载药体系,而且具备pH、还原双响应性以及主动肝靶向性,能够改善传统明胶微球的药动学性质。
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