【摘 要】
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本文是关于中药单体盐酸黄连素对禽大肠杆菌恩诺沙星耐药性消除作用的研究。以亚抑菌浓度的恩诺沙星对鸡源大肠杆菌标准菌株O78S进行人工诱导,获得了低、中、高三株恩诺沙
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本文是关于中药单体盐酸黄连素对禽大肠杆菌恩诺沙星耐药性消除作用的研究。以亚抑菌浓度的恩诺沙星对鸡源大肠杆菌标准菌株O78S进行人工诱导,获得了低、中、高三株恩诺沙星耐药株。从临床分离筛选获得了两株鹅源大肠杆菌耐恩诺沙星耐药株。以盐酸黄连素为消除剂,以大肠杆菌耐恩诺沙星耐药株O78H、CE(O141H)和CE(O128L)为靶细菌,以影印培养法,进行体外耐药质粒消除试验,并以SDS作为对照。
对消除子进行质粒抽提,经琼脂凝胶糖电泳后。
对受试菌株gyrA和parC基因QRDR片段进行PCR扩增,测序和突变分析。临床分离的高度耐药株,其GyrA蛋白QRDR区发生氨基酸的替代的数目有增至2个(Ser83→Leu83+Asp87→Asn87),ParC蛋白的QRDR区也发生1个氨基酸的替代(Ser80→Ile80)。
采用肉汤稀释棋盘法测定盐酸黄连素与恩诺沙星联合对鸡源大肠杆菌标准株O7ss、体外人工诱导耐药株O78L和O78H、临床分离鹅源大肠杆菌耐药株CE(O128L)和CE(O141H)的体外抗菌活性,以部分抑菌浓度指数(FIC)为联合药敏试验的判断依据。
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