研究背景：原发性胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,每年约有17万人死于胃癌,几乎接近全部恶性肿瘤死亡人数的1/4，且每年还有近20万新病例产生。手术切除仍是目前胃癌治疗的主要手段,但因绝大多数病人在确诊时已届中晚期,即使是实行根治性胃癌切除术,在短时间内也会很快出现肿瘤的复发和转移。尽管临床采用了包括手术治疗、化学治疗、放射治疗及介入治疗等多种治疗方法,但并未明显提高患者的五年生存率。如果能够早期诊断,胃癌是一种可以治愈的疾病。然而由于缺乏筛选程序,大部分病例都是在几乎中、晚期才得以确诊。因此,一方面,寻找评估胃癌患者预后的指标对于临床制定合理有效的治疗方案具有实际意义；另一方面,探索胃癌早期诊断的生物学标志尤为重要。目的和方法：本研究采用免疫组织化学方法对原发性胃腺癌组织中Reprimo、S100A2蛋白的表达水平进行检测,采用甲基化特异性PCR法检测Reprimo基因启动子甲基化状态,并选取胃高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变病例和正常胃粘膜组织作为对照。旨在探讨Reprimo、S100A2蛋白表达与胃癌发生、发展及肿瘤浸润转移的关系,寻找胃癌可靠的预后指标；同时研究Reprimo基因启动子甲基化与胃癌发生发展的关系,寻找胃癌早期诊断的生物学标志。结果：1、在正常胃粘膜组织、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变和胃腺癌组织中,Reprimo蛋白阳性表达率分别为100%、80%、36.67%、35%；S100A2蛋白阳性表达率分别为100%、86.67%、46.67%、48%。正常胃粘膜组织、低级别上皮内瘤变中,Reprimo及S100A2蛋白阳性表达率都高于高级别上皮内瘤变及胃腺癌组织。Reprimo、S100A2在高级别上皮内瘤变及胃腺癌组织中阳性表达率无明显差异。2、Reprimo蛋白在高／中分化胃腺癌中阳性表达率为32.65%(16/49)、低分化胃腺癌为37.25%(19/51),Reprimo的表达与胃腺癌的分化程度无关(x2=0.23,P>0.05)；在肿瘤侵及粘膜／粘膜下层胃腺癌组Reprimo蛋自阳性表达率为80.00%(12/15),显著高于肿瘤侵及肌层／浆膜层胃腺癌组的阳性表达率27.06%(23/85)(x2=15.71,P<0.01)；在无淋巴结转移胃腺癌组Reprimo蛋白阳性表达率为61.76%(21/34),也明显高于有淋巴结转移胃腺癌组的阳性表达率21.21%(14/66)(X2=16.22,P<0.01)。在高／中分化胃腺癌中S100A2蛋白阳性表达率为61.22%(30/49)、低分化胃腺癌为35.29%(18/51),低分化胃腺癌组S100A2蛋白阳性表达率明显低于高／中分化胃腺癌组(X2=6.73,P<0.01)；肿瘤侵及粘膜／粘膜下层组S100A2蛋白阳性表达率为73.33%(11/15),明显高于侵及肌层／浆膜层胃腺癌组的阳性表达率43.53%(37/85)(x2=4.54,P<0.05)；有淋巴结转移胃腺癌组s100A2蛋白阳性表达率仅为36.36%(24/66),无淋巴结转移胃腺癌组S100A2蛋白阳性表达率却高达70.59%(24/34),其差异有统计学意义(X2=10.53,P<0.05)。3、在35例Reprimo蛋白阳性表达的病例中,S100A2蛋白呈阳性表达者26例,在65例Reprimo蛋白阴性表达的病例中,S100A2蛋白呈阳性表达者22例,两者表达呈明显正相关(r=0.386)。4、Reprimo基因启动子甲基化检出率在正常胃粘膜组织、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变和原发性胃腺癌组织中逐渐升高,分别为0.00%,6.67%,37.50%,66.67%。原发性胃腺癌组Reprimo基因启动子甲基化检出率高于高级别上皮内瘤变组、低级别上皮内瘤变组和正常胃粘膜组,其差异均具有统计学意义(x2值分别为4.23,16.50,12.30,：P<0.01或P<0.05)。5、Reprimo基因启动子甲基化检出率虽然在低分化胃腺癌组为76.92%(19/51),高于其在高／中分化胃腺癌组中的检出率54.55%(12/22),但二者差异无统计学意义(x2=2.69,P>0.05)；在肿瘤侵及粘膜／粘膜下层胃腺癌组Reprimo基因启动子甲基化检出率为50.00%(5/10),其在肿瘤侵及肌层／浆膜层胃腺癌组的检出率为71.05%(27/38),两者差异亦无显著统计学意义(x2=0.77,P>0.05)；在有及无淋巴结转移胃腺癌组Reprimo基因启动子甲基化检出率分别为68.97%(20/29)、63.16%(12/19),其差异也无统计学意义(x2=0.17,P>0.05)。6、在28例出现Reprimo蛋白表达缺失的原发性胃腺癌病例中,有22例存在甲基化(г=0.299)。表明Reprimo基因在原发性胃腺癌中表达缺失或下调与其启动子高甲基化有关。结论1. Reprimo、S100A2蛋白的表达下调可能与胃腺癌的发生和发展有关,提示Reprimo、S100A2作为候选抑癌基因,在一定程度上能够抑制胃腺癌的发生发展。随着胃腺癌浸润深度的增加以及发生淋巴结转移,Reprimo、S100A2蛋白表达也逐渐降低,表明Reprimo、S100A2与胃腺癌的浸润转移能力密切相关,低的Reprimo、S100A2蛋白阳性表达率常意味着肿瘤高的浸润转移能力。提示Reprimo、S100A2的表达有助于临床判断肿瘤的恶性程度和侵袭转移能力,可作为临床判断胃腺癌预后的指标。2. Reprimo、S100A2蛋白在胃腺癌中表达呈明显正相关,提示了ReprimoS100A2在胃腺癌发生发展过程中可能存在协同作用。3.原发性胃腺癌组织中Reprimo基因启动子甲基化检出率高于高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变和正常胃粘膜组织,故可推测,在胃腺癌的形成过程中,Reprimo基因启动子甲基化是一个频发事件,在胃腺癌形成早期就可能发挥作用,促进胃腺癌的形成。Reprimo基因启动子甲基化可作为胃腺癌早期诊断的生物标志。4. Reprimo基因启动子甲基化与其蛋白表达缺失明显相关,表明Reprimo蛋白在原发性胃腺癌中表达缺失或下调与其启动子高甲基化有关。