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骨形成蛋白(BMP)作为一种骨肿瘤的相关抗原，在骨肿瘤的临床医学研究中具有重要意义。1990年我科在国内外首先研制出抗牛BMP单克隆抗体(bBMP-McAb)，研究中发现，该单抗可选择性地集中于有新骨形成的区域，而正常骨组织内含量很少；用放射性碘元素标记的bBMP-McAb可聚集于患者体内的骨肉瘤部位；免疫组化研究显示骨、软骨肉瘤细胞内含有丰富的BMP。由此可见，bBMP-McAb在骨、软骨肉瘤的导向治疗中具有极大的潜在应用价值。由于鼠源性单抗直接用于人体时易发生免疫反应，从而限制了该种抗体的临床应用。近年来基因工程技术的不断发展，多种鼠源性单抗的改建成功，为鼠源性单抗的临床应用开辟了广阔前景。在此背景下，作者对bBMP-McAb进行了改建研究。 首先，作者对液氮冻存的bBMP-McAb杂交瘤细胞进行筛选，并制备bBMP-McAb，通过免疫组化染色和bBMP生物活性阻断实验，证明该抗体具有良好的活性。收集培养的bBMP-McAb杂交瘤细胞，并提取细胞总RNA，应用oligo-(dT)为引物反转录生成cDNA。以cDNA为模板，利用两对根据小鼠免疫球蛋白J区和V区序列设计合成的寡核苷酸引物，通过聚合酶链式反应，分别扩增出bBMP-McAb重链、轻链可变区基因片段(V_H、V_L)。分别将V_H、V_L克隆入pUC18、19载体中，并以重组的pUC18、19为模板，利用Sanger’s双脱氧链终止反应，测定V_H、V_L基因序列，序列测定结果输入计算机进行网络基因库比较分析。结果显示，V_H基因全长345bp，编码115个氨基酸，隶属小鼠IgG2BV_H