流感病毒与宿主细胞因子的相互作用和抗流感病毒化合物的筛选

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流感病毒是属于正粘病毒科的负链RNA病毒。流感病毒大流行会给人类生命健康造成严重威胁。通过研究流感病毒与宿主细胞因子间的相互作用可以加深对流感病毒的认识,也可以为抗流感药物的开发提供新靶点。目前以达菲为代表的抗流感药物面临严重的耐药性问题,筛选新型的流感病毒抑制剂具有重要意义。  流感病毒转录需要摘取宿主细胞mRNA的帽子结构作为引物来起始。DSIF和NELF是RNA聚合酶polⅡ的转录延伸调节因子,可以使polⅡ停滞在基因的启动子区,推测这个过程有利于病毒聚合酶摘取帽子结构。染色质免疫沉淀实验证明流感病毒感染后DSIF和NELF在看家基因的启动子区结合增强。将细胞中的DSIF敲低后,流感病毒的复制受到抑制,说明DSIF和NELF能够辅助流感病毒复制。  宿主细胞MicroRNA能够调控病毒的复制过程。通过比较流感病毒复制差异明显的细胞系中MicroRNA表达谱,利用双荧光报告系统筛选出了可能与流感病毒M片段具有相互作用的MicroRNAMir-33a。Mir-33a能抑制流感病毒的复制,与M片段相互作用位点定位在5端1-340区域。同时也筛选出了能够间接抑制流感病毒的Mir-21,Mir-27a和Mir-194。  利用流感病毒启动子报告细胞株HeLa-IAV-Luc从微生物代谢产物化合库中筛选出了能够抑制流感病毒的化合物Colletodiol。Colletodiol对血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)功能没有影响,能够抑制流感病毒RNA聚合酶的活性,导致病毒RNA合成受到抑制。
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