枯草芽孢杆菌对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1诱导表达的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:laiyq
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防御素(defensins)是一类富含半胱氨酸的阳离子小分子抗菌肽,广泛分布于生物界中,是最大的内源性抗菌肽家族成员,β-防御素在绵羊瘤胃上皮细胞中的表达量最大,益生菌可作用于上皮细胞而提高机体免疫力。本研究选用益生枯草芽孢杆菌,研究其对体外培养的绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素表达的调节作用。首先,在体外培养绵羊瘤胃上皮细胞,然后用不同浓度的枯草芽孢杆菌分别对绵羊瘤胃上皮细胞进行不同时间的刺激,利用实时荧光定量PCR技术(realtime fluorescence quantitative PCR, RT-PCR)从mRNA水平及酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)技术从蛋白水平检测刺激后上皮细胞中绵羊β-防御素-1(Sheep Beta-Defensin-1, SBD-1)基因表达水平的差异,并对枯草芽孢杆菌对SBD-1诱导的信号通路进行了探讨。结果表明:菌液浓度为1010 cfu/mL且刺激时间为8h时,SBD-1的表达量最大,且不同的菌液浓度对SBD-1的表达均有诱导作用,通过比较,菌液浓度为109、1010、1011cfu/mL刺激下SBD-1的表达量与空白相比差异极显著(P<0.01),且mRNA水平与蛋白水平的结果基本一致。枯草芽孢杆菌诱导SBD-1的表达是由丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路中的p38分裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路、c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路和细胞外信号调节蛋白激酶(ERK 1/2)通路介导的,并且p38 MAPK信号转导通路途径是主要通路。
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