春剑种子胚胎发育及非共生萌发研究

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春剑(Cymbidium.tortisepalum var.longibracteatum)是具有重要观赏价值和遗传资源价值的正宗“川兰”,但其种子萌发是制约春剑繁殖的生物学瓶颈问题,其萌发机理和条件尚不明确。本试验以春剑为材料,对其果实发育及解剖特征、胚胎发育及种子形成、种子萌发途径和非共生萌发条件进行了研究,主要结果如下:1、春剑的果实发育呈“双S”曲线,授粉后0-40d为第一次迅速生长期,授粉后40-50d为第一次缓慢生长期,授粉后50-80d为第二次迅速生长期,授粉后80-150d为第二次缓慢生长期,果荚成熟后纵横径分别为74.84mm、16.12mm。果实分为六个瓣膜,其中三瓣带“V”字形胎座,为可育瓣,三瓣无胎座,为不育瓣。春剑种子单粒重约3.92±0.40μg,一个果荚中种子含量约37.98±3.71万粒。2、春剑从授粉到受精的间隔时间约60d。合子第一次不均等分裂形成基细胞和顶细胞。基细胞不参与胚体的形成,分化为含5个细胞的胚柄结构,种子成熟后胚柄退化消失。顶细胞经多次分裂形成球形胚,种子成熟时球形胚未分化。胚胎发育类型为茄型。春剑种皮有内外两层,种子成熟时内种皮收缩成致密的膜紧贴胚体,内外种皮间存在空气腔。3、春剑种子萌发有两种方式:一是种胚先向合点端伸长,后膨大撑破种皮;二是种胚从垂直于种皮的侧面膨大突破种皮。萌发过程中两种方式同时存在。种胚突破种皮后开始转绿,发育形成原球茎,再经根状茎途经发育成幼苗。种子萌发过程存在愈伤组织和类原球茎两种中间繁殖体,两种中间繁殖体均能通过体细胞胚胎发生途径实现植株再生。4、春剑种子非共生萌发最适宜的采收时间为授粉后120d;最适宜的预处理方式为4℃冷藏处理30d;最适合种子萌发的培养基为Hyponex培养基+1.0mg/L GA3,其启动萌发时间为86d,萌发数最高,达61.33个/瓶。培养基中加入活性炭能促进种子萌发,加入香蕉汁和土豆汁对种子萌发无促进效果。
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