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近十年来，冠状病毒引起了一系列人畜共患疾病的爆发，其中最近的就是在2012年被发现的中东呼吸系统综合征冠状病毒(MERS-CoV)。由于现今世界各地区之间的交流越来越频繁，MERS病毒的传播几率也随之增加。加之目前尚无有效的疫苗以及药物，因此开发出更快、更准确、更便捷的病毒检测方法对于及时发现和控制病毒疫情有着非常重要的意义。 在目前MERS病毒的临床样本检测中，RT-PCR检测技术使用最为广泛。RT-PCR检测涉及到RNA的提取、逆转录以及DNA扩增等过程，其中任何一步操作失误都可能导致整个检测的失败。因此，一般检测试剂盒需要阳性参考物质来进行质控。现有的阳性参照如质粒、反转录RNA、灭活病毒等还存在着模拟性不足、安全性不够的缺点，为了构建出一种囊括MERS病毒临床检测全过程的标准参考物质，本研究利用慢病毒包装系统包装出含有MERS病毒被检测靶标基因RNA的假病毒颗粒。包装好的假病毒颗粒安全性强，无自我复制能力;性质稳定，在37℃放置一周仍能满足商业试剂盒的检测要求;模拟性强，在利用数字PCR以及商业试剂盒检测时都表现出了很好的检出率。将由假病毒颗粒制备的模拟样品盘寄送至全国49家实验室，各单位采用各自的检测方法以及试剂盒进行MERS病毒的诊断:所有检测结果均获得了100％的正确率。结果表明，本研究构建的假病毒颗粒能够模拟MERS病毒从RNA提取至扩增检测整个过程，安全性和稳定性高，可以替代传统阳性参考物质进一步提高诊断过程的有效性和准确率，也可用于不同核酸检测实验室能力的评估。 MERS病毒的抗体检测对于MERS病毒的流行病学调查等有着非常重要的意义，现有的MERS病毒抗体检测方法，如:ELISA、IFA、PRNT，假病毒中和试验中存在着成本高、操作难、检测时间长的缺点。为了克服这些抗体检测方法的不足，本研究基于噬菌体裂解酶细胞壁结合蛋白(CBD)会与金黄色葡萄球菌表面CBD受体特异性结合这一特性，通过将MERS核蛋白(NP)与CBD融合表达，与被TTC染成紫红色的金黄色葡萄球菌孵育制成探针，利用协同凝集原理以及金黄色葡萄球菌表面天然表达A蛋白(Protein A)可以与抗体的Fc端结合的特性，建立了一种新的MERS病毒抗体检测方法，在10min内通过肉眼观察即可实现检测，简单便捷，具有用于现场快速筛查的潜力。 本研究发展的方法虽然是以MERS病毒为靶标构建的标准参考物质以及抗体检测的方法，但同样的思路完全可以进一步发展应用到其他病毒的检测中，应用面广。