论文部分内容阅读
目的：检测激肽释放酶9（Kallikrein9，KLK9）基因在肝癌组织中的表达水平，分析KLK9基因的表达与肝癌临床病理特征（包括患者的年龄、性别、标本的大小及肝癌细胞恶性程度、临床TNM分期、以及是否转移和HBsAg阳性）的关系及临床意义。通过检测KLK9基因在一株正常肝细胞及四株恶性程度不同的肝癌细胞中的表达,研究KLK9基因的表达与细胞恶性程度的关系。探讨KLK9基因在肝癌的发生发展中作用及相关分子机制，为肝癌的诊断及生物靶向治疗提供理论及数据依据。方法：1、收集50例具有完整临床资料的肝癌组织（术前无其他恶性肿瘤病史、未经放疗、化疗、生物治疗等）及在距离病灶边缘2cm处切取部分正常肝脏组织作为癌旁对照组，以及25例因肝内胆管结石及外伤切除部分正常肝组织作为正常对照组。2、应用免疫组化检测KLK9蛋白质在肝癌组织（n=50）、癌旁组织(n=50)、正常组织(n=25)中KLK9蛋白质的表达。分析KLK9蛋白表达与肝癌临床病理特征关系。3、通过RT-PCR方法检测KLK9基因mRNA在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中的表达，探讨分析KLK9与肝癌临床病理特征的联系。4、通过RT-PCR及Western Blot方法检测一株正常肝细胞与四株不同恶性程度的肝癌细胞中KLK9基因mRNA和蛋白质的表达差异，分析KLK9mRNA及蛋白质表达水平与肝癌细胞恶性程度之间的联系。结果：1、肝细胞癌组织中KLK9mRNA及蛋白质表达率较癌旁组织及正常肝脏组织中明显升高，二者差异具有统计学意义（P＜0.05）。2、KLK9mRNA及蛋白质表达与肝癌是否转移、分化程度、临床分期、性别有关（P≤0.05），差异有统计学意义；和患者的年龄、肿瘤的大小以及HBsAg情况无关（P＞0.05）。3、KLK9mRNA及蛋白质在肝癌细胞株中的表达随着肝癌细胞恶性程度的升高而升高，在正常肝细胞株中低度表达（P≤0.05）。结论：1、KLK9基因mRNA及蛋白质在肝癌组织中的表达与肝癌组织的恶性程度有关系，在正常肝脏组织中低度表达，在肝癌组织中高度表达，且肝癌组织恶性程度越高KLK9表达水平越高。2、KLK9基因表达与肝癌细胞是否远处转移有关，KLK9在未发生远处转移的肝癌组织中的表达更低，KLK9在发生远处转移的肝癌组织中的表达更高。3、KLK9基因表达与肝癌患者性别有关系，KLK9在男性患者中的表达水平高于在女性患者中的表达水平。4、KLK9基因在肝癌细胞株中的表达与肝癌细胞株的恶性程度有关系，在正常肝细胞株中低水平表达，在4株肝癌细胞株中高水平表达，且随肝癌细胞株的恶性程度的升高而升高。