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共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是一种功能性油脂,是食物中的天然成分,对人体无毒副作用,主要存在于牛、羊等瘤胃动物的乳脂及肉制品中。近年来大量动物试验表明CLA具有抗癌、抗动脉粥样硬化、降低脂肪沉积等重要生理功能。异油酸(Vaccenic acid,VA,t11-C18:1)是一种天然反式脂肪酸,目前关于反式脂肪酸与癌症的关系还尚不明确,需进一步深入研究。本文应用人乳腺癌MCF-7细胞为体外模型,用MTT法、荧光染色及流式细胞术比较了3种CLA异构体(c9,t11-CLA,t10,c12-CLA,t9,t11-CLA)及2种反式脂肪酸(反油酸、异油酸)对乳腺癌细胞MCF-7细胞生长、凋亡及细胞周期的影响,以筛选出更有效抗癌的CLA异构体,并探讨反油酸、异油酸对MCF-7细胞的影响。另外,运用RT-PCR和Western-blot方法研究3种CLA单体激活PPARγ的能力和PPARγ调控凋亡相关基因和蛋白表达之间的相互关系,从基因和蛋白水平阐明CLA单体及异油酸诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的可能机制,为尽早将这一天然产物应用于乳腺癌的防治提供实验依据。实验结果如下:3种CLA异构体及反式脂肪酸VA作用MCF-7细胞48 h后,均可抑制MCF-7细胞增殖并促进细胞凋亡,且抑制作用呈剂量依赖性,但CLA的抑制作用显著强于VA。在浓度≤50μmol/L时,t10,c12-CLA的抑制作用强于c9,t11-CLA,而≥100μmol/L时,c9,t11-CLA的抑制作用强于t10,c12-CLA。t9,t11-CLA单体在浓度为50μmol/L时对MCF-7细胞的增殖抑制率就达到了34.01%,它在抑制MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡方面是最有效的CLA单体。EA作用MCF-7细胞48 h后,则表现出在一定剂量范围内促进MCF-7细胞增殖。与对照组相比,各CLA单体及VA组随着作用浓度的增加,MCF-7细胞G0/G1期缩短,S期延长,显然,CLA及VA可将细胞阻滞在S期,阻滞了DNA合成,不能继续完成下面的细胞周期活动,从而抑制细胞增殖。由此可以推测CLA及VA可能通过影响细胞周期进程从而抑制细胞分裂增殖并诱导凋亡。不同CLA异构体能促进MCF-7细胞中PPARγ基因及其蛋白的表达,而且PPARγ的变化与促凋亡基因bcl-xS的变化趋势相一致。反式脂肪酸VA也能促进促凋亡基因bcl-xS mRNA及蛋白Bax的表达。100μmol/L c9,t11-CLA,50μmol/L t10,c12-CLA,50和100μmol/L t9,t11-CLA组的抑凋亡基因bcl-xL mRNA及其蛋白Bcl-2表达均下降,其中t9,t11-CLA组,抑凋亡基因bcl-xL mRNA及其蛋白表达水平明显降低。从bcl-xS与bcl-xL mRNA及其蛋白Bax与Bcl-2的表达比例可知,VA和c9,t11-CLA在100μmol/L时表达最高,而t10,c12-CLA和t9,t11-CLA则在50μmol/L时表达最高。结果表明VA和3种CLA异构体均能引起凋亡相关基因bcl-xS与bcl-xL及其蛋白Bax与Bcl-2的表达变化,只是表现出的最佳浓度不同。CLA单体通过促进PPARγ的表达进而调控相关凋亡基因及其蛋白的表达,从而诱导细胞凋亡。