盐藻多糖合成关键酶—尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(DsUGD)基因分析及耐盐相关性研究

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已有研究表明多糖可以作为一种渗透调节剂和缓冲剂保护机体免受高盐等胁迫条件对机体造成的危害。盐藻(Dunaliella salina)是一种极端的耐盐生物,但是对于多糖在其耐盐中的作用及机制尚未见相关报道。因此,开展盐藻多糖相关的研究对于认识盐藻耐盐机制具有重要的意义。 尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UDP-glucose dehydrogenase,UGD)催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDP-glucose)生成尿苷二磷酸葡糖醛酸(UDP-glucuronic acid),该产物是多糖合成中的一种最重要的前体物质。本实验室首次从盐藻中克隆得到尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶DsUGD基因,并发现高盐胁迫对DsUGD基因具有明显的诱导作用。在此研究基础上,本研究通过高盐胁迫下盐藻多糖变化以及DsUGD在翻译水平上表达差异等实验,进一步揭示了该基因与盐胁迫之间的关系,并探讨了DsUGD基因在盐藻耐受盐胁迫的早期机制中的作用。本实验的主要内容包括: 1、盐胁迫下盐藻多糖产量的变化趋势 通过对胞内和胞外多糖的提取测定,结果表明胞外多糖在高盐(3.5mol/L)胁迫下产量高于0.5mol/L、1.5mol/L条件下产量,并且多糖产量从1h开始上升,在2h达最大值,此后逐渐降低,8h达到平稳下降趋势;胞内多糖含量在0~8h之间变化不大,但3.5mol/LNaCl胁迫下,盐藻多糖含量明显高于1.5mol/L和0.5mol/LNaCl条件下胞内含量。这表明在外界盐胁迫条件下,盐藻多糖参与到机体抵制胁迫的过程,为进一步研究DsUGD基因在盐藻中的功能打下基础。
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