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目的：本实验以人大肠腺癌细胞株SW620为研究对象,运用RNA干扰技术将人大肠腺癌细胞中的ARD1基因干扰沉默。通过建立人大肠腺癌细胞SW620的ARD1稳定沉默细胞系,采用MTT法、Annexin V/PI双染法、PI单染法检测干扰稳定细胞的增殖、凋亡和周期变化情况,在细胞水平上,揭示人ARD1在大肠癌发生、发展中的作用,为进一步研究其在大肠癌发生中的作用机制奠定基础。方法：1.SW620细胞的培养；2.构建ARD1-shRNA (U6)干扰载体；3. ARD1-shRNA (U6)干扰载体转染人大肠腺癌细胞SW620,通过G418筛选建立人ARD1沉默的稳定细胞系；4.利用RT-PCR和Westernblot检测干扰稳定细胞的ARD1表达水平；5.采用MTT法、Annexin V/PI双染法、PI单染法检测干扰稳定细胞的增殖、凋亡和周期变化情况；根据干扰沉默细胞增殖、凋亡和周期变化情况,结合文献报导分析ARD1的生物功能以及在大肠癌发生发展中的作用；6.应用SPSS17.0统计软件进行统计学处理,两组均数的比较用t检验；多组均数的比较用方差分析；方差不齐时先进行变量转换。显著性水准a=0.05。结果：1.SW620细胞体外培养成功且生长状态良好；2.成功构建沉默质粒pENTRTM/U6-shRNA/ARD1;3.成功建立沉默人ARD1的人大肠腺癌SW620细胞的稳定细胞系；4.RT-PCR和Westernblot检测干扰稳定细胞的ARD1表达水平,发现干扰稳定细胞的mRNA和蛋白表达水平降低,与原始正常细胞比较,差异有统计学意义；5.利用MTT法、Annexin V/PI双染法、PI单染法检测沉默ARD1的SW620稳定细胞的增殖、凋亡和周期情况,发现人ARD1干扰沉默后大肠腺癌SW620细胞的增殖减少,凋亡增多；细胞周期明显阻滞于G0/G1期,差异均有统计学意义。结论：1.shRNA-ARD1可下调大肠腺癌SW620细胞中ARD1的mRNA水平和蛋白水平；2.干扰人ARD1基因的表达,可使大肠腺癌SW620细胞的增殖减少,凋亡增多；并且使细胞周期明显阻滞于G0/G1期。