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目的:1、通过观察狼疮鼠、脂多糖刺激狼疮鼠及健康鼠肾组织细胞焦亡因子和调控基因NLRP3表达差异,探讨细胞焦亡信号通路及调控因子与SLE炎症反应的关系;2、通过观察狼疮鼠肾组织细胞焦亡因子、调控因子NLRP3在滋阴清热药作用下的表达变化,探讨滋阴清热药对SLE炎症相关细胞焦亡因子和调控因子NLRP3的作用,并以电镜观察肾小球损害情况,研究滋阴清热药对SLE肾组织的治疗作用,为滋阴清热药控制SLE炎症反应研究提供思路及方法。方法:1、SPF级B6.MRL-Faslpr/Jnju雌性狼疮鼠20只,SPF级C57BL/6JN雌性健康鼠10只,周龄均为8-10周;按体重及生长状况把模型鼠随机分为:(1)脂多糖组(L组)(n=10):脂多糖按8mg·kg-1剂量腹腔注射,两天一次,干预6周。(2)模型组(M组)(n=10):与脂多糖等容积生理盐水腹腔注射,两天一次,干预6周。健康鼠为(3)空白组(C组)(n=10):与脂多糖等容积生理盐水腹腔注射,两天一次,干预6周。用药时观察记录各小鼠体重、活动、体貌等变化情况;6周后取肾组织应用免疫组化、及荧光定量PCR检测各组肾组织细胞焦亡因子Caspase-1、IL-1β和调控因子NLRP3表达差异。2、SPF级B6.MRL-Faslpr/Jnju雌性狼疮鼠20只,SPF级C57BL/6JN雌性健康鼠10只,周龄均为8-10周;按体重及生长状况把模型鼠随机分为:(1)中药组(T组)(n=10):滋阴清热药按20 g·kg-1·d-1剂量灌胃(人等效剂量的2倍),干预6周。(2)模型组(M组)(n=10):每天予滋阴清热药等容积灌胃无菌蒸馏水,干预6周。健康鼠为(3)空白组(C组)(n=10):每天予滋阴清热药等容积灌胃无菌蒸馏水,干预6周。用药时观察记录各组小鼠体重、活动、体貌等变化情况。6周后取肾组织电镜观察肾小球病理情况,免疫组化及荧光定量PCR检测各组肾组织细胞焦亡因子Caspase-1、IL-1β和调控因子NLRP3表达差异,及足细胞靶抗原Nephrin表达变化。结果:1、免疫组化结果显示LPS组和模型组Caspase-1和IL-1β表达阳性位点比空白组多,染色更深;LPS组后阳性位点比模型组多,黄染更明显;平均光密度值比较,模型组Caspase-1、l L-1β表达比空白组高,差异有统计学意义(p<0.05);LPS组比模型组高(p<0.05),而对比于空白组更明显(p<0.01);荧光定量PCR结果显示模型组Caspase-1、lL-1β和调控因子NLRP3肾皮质mRNA表达量比空白组高,差异有统计学意义(p<0.05),而LPS组表达比模型组高,差异有统计意义(p<0.05)。2、滋阴清热药治疗后,中药组IL-1β免疫组化染色明显比模型组浅,阳性位点有所减少;平均光密度值和荧光定量PCRmRNA表达结果均显示中药组IL-1β比模型组低,差异有统计学意义(p<0.05),中药组Caspase-1染色和模型组差异不大,平均光密度值和mRNA表达和模型组数据差别无统计学意义(p>0.05),但中药组数值比模型组低,有降低趋势;荧光定量PCR结果显示中药组NLRP3mRNA表达量数值比模型组低,但差异无统计意义(p>0.05);免疫组化结果显示中药组Nephrin表达区域分布较模型组增强,但仍比空白组少,平均光密度值中药组比模型组高(P<0.05)。电镜显示中药组可改善肾皮质区内肾小球和肾小管变性,足细胞密度结果显示中药组比模型组升高(P<0.05),但中药组和模型组与空白组对比均减少(P<0.05)。与空白相比,模型组和中药组足突宽度明显增加(P<0.01),而中药组较模型组缩小(P<0.05)。结论:1、细胞焦亡因子及调控因子NLRP3可能是SLE炎症反应产生的重要途径。2、滋阴清热药可降低细胞焦亡因子及调控因子NLRP3表达,同时能减轻肾脏足细胞损伤及足细胞裂孔膜相关分子Nephrin蛋白表达降低,这可能是滋阴清热药控制SLE炎症反应的重要途径。