背景与目的食管癌是一种严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一,在世界范围内发病率呈上升的趋势。它的预后极差,即使是接受手术的患者也有90%会复发转移,因此,食管癌的诊断极其重要。食管癌主要分为鳞癌和腺癌两类,我国食管癌发病的主要类型是食管鳞状细胞癌(ESCC)。非编码RNA(nc RNA)是一类不编码蛋白的RNA,根据非编码RNA片段的长度可以将其分为短链非编码RNA(如si RNA、pi RNA和micro RNA等)和长链非编码RNA(lnc RNA)。Nc RNAs几乎在基因生命周期的每一个步骤中都有参与,从基因的转录到m RNA剪接,再到RNA的衰变和翻译。micro RNA的组成是一类长度约为20-23 nt的非编码型小分子RNA。研究发现约半数以上的m RNAs受mi RNAs的调控,同时一种micro RNA也可以几百个目标基因的靶点。micro RNAs作为基因的重要调控因子,micro RNAs的失调也常见于各种疾病,包括肿瘤的形成、发展、转移及预后等。Lnc RNA是一类不能够编码蛋白质且转录长度超过200nt的RNA分子,它能够以RNA的形式在表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等多种层面上调控基因的表达水平。已有证据表明lnc RNAs不仅能够对哺乳动物的细胞具有转录调控作用,而且对于micro RNAs也具有调节功能。H19是长链非编码RNA中的一种,于多种疾病中被研究,与micro RNAs的表达密切相关。let-7则是最早发现的micro RNAs的一员,于多种肿瘤表达下降,被认为是一种肿瘤抑制基因,let-7a是let-7家族的一种。然而let-7a和H19于ESCC中罕见报道。本实验拟对ESCC患者组织中H19和let-7a进行检测,研究ESCC组织中H19和let-7a的表达状况,其与临床病例因素的关系,以及两者之间的相关性,此外对血浆中let-7a进行检测分析,探讨其作为肿瘤标志物的可能性。方法1收集30例ESCC患者手术后的ESCC病变组织及对应癌旁正常食管粘膜组织,统计患者的基本信息及临床病理资料。采用2-ΔΔCT实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)方法检测癌组织和相对应癌旁正常组织中let-7a和H19的表达水平。2收集110例血浆标本,其中ESCC患者70例为实验组,健康体检者40例为对照组,统计受试者的基本信息及临床病理资料。采用2-ΔΔCT q RT-PCR方法检测血浆中实验组和对照组let-7a的表达水平。3采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析癌组织及癌旁组织中H19和let-7a的表达水平,评价其表达变化与ESCC患者临床病理因素之间的关系,以及let-7a与H19之间的相关性,对血浆中let-7a表达变化进行检测,分析其与ESCC患者临床病理因素之间的关系,并计算其作为肿瘤标志物的灵敏度和特异度。结果1和正常食管粘膜组织相比,let-7a在ESCC组织中相对表达量为0.79±1.10表达下降(P<0.05),H19在ESCC组织中相对表达量为5.11±10.85表达升高(P<0.05)。2 ESCC患者食管组织中let-7a在Ⅲ/Ⅳ期相对表达量(0.29)显著低于Ⅰ/Ⅱ期(0.55),差异有统计学意义(P<0.05),H19在临床病理分期Ⅲ/Ⅳ期相对表达量(3.26)显著高于Ⅰ/Ⅱ期(1.14),差异有统计学意义(P<0.05),let-7a和H19的表达与性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移和组织学分级均无关。3 ESCC组织中H19水平和let-7a成负相关,相关系数为0.867,P<0.05。4和对照组相比,let-7a在食管癌血浆中的相对表达量为0.53±0.43,表达量低于对照组(P<0.05),ROC曲线下面积为0.829(95%CI:0.754~0.904),当cut-off值设为6.22时,其灵敏度和特异性分别为74.3%和85.0%,临床病理分期Ⅰ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期患者血浆let-7a相对表达量的中位数分别为0.42和0.24,差异有统计学意义,而与性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移和组织学分级均无关。结论ESCC患者组织中let-7a表达降低,H19表达升高,let-7a和H19的相对表达量与临床分期有一定相关性,且两者之间具有一定的相关性,说明let-7a和H19两者之间可能具有调控作用并在肿瘤的发生发展过程中有重要作用。此外,let-7a在血浆中表达下降并与与临床分期有一定相关性,且具有较高的灵敏度和特异度,提示let-7a能成为潜在的肿瘤标志物。