【摘 要】
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为了探讨麂亚科动物间的亲缘关系,该论文以赤麂(Muntiacus munt jak)、黑麂(Muntiacus crinifrons)、小麂(Muntiacus reevesi)和毛冠鹿(Elaphoduscephalophus)这4种麂亚科动
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为了探讨麂亚科动物间的亲缘关系,该论文以赤麂(Muntiacus munt jak)、黑麂(Muntiacus crinifrons)、小麂(Muntiacus reevesi)和毛冠鹿(Elaphoduscephalophus)这4种麂亚科动物为材料,以核基因序列为研究对象,作进一步的研究.我们提取了动物的基因组DNA.根据人的GAPDH基因和毛冠鹿的钾通道基因设计引物.以基因组DNA为模板,进行PCR扩增.扩增GAPDH基因片段的大小约为300bp,扩增钾通道基因片段的大小约为940bp.将获得的目的条带割胶、回收和纯化.采用T-A互补克隆法,将纯化后的扩增产物克隆到质粒pMD 18-TVector中,转化DH-5α菌,菌落PCR鉴定并挑选阳性克隆,用M13-47/RV-M通用引物进行测序.测序的结果经clustalw软件进行同源性比较.说明基因序列能够与形态分类学结论一致.麂属动物之间的序列差异为0﹪~1.5﹪,毛冠鹿属与麂属之间的序列差异为1.5﹪~2.0﹪.对所得的基因序列用MEGA软件包进行系统进化分析,NJ法和最大简约法(MP)构建毛冠鹿和麂属3种动物的分子系统进化树.此外,用构建的融合表达载体pcDNA3.1(+)/hsBLyS转染真核宿主细胞COS-7,然后在合适的培养条件下进行表达,取不同表达时间(48h、72h和96h)的细胞破碎后进行分析鉴定,找出最合适的表达时间及其他条件.
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