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背景与目的
近年来人们对乙醇的饮用越来越多,由此引发的社会问题日益突出,其中最常见的就是酒后驾车。酒后驾车是一个世界性的问题,我国是世界上因交通事故死亡人数最多的国家之一。世界各国对酒后驾车有着严格的处罚措施,处罚标准也轻重不一。虽然我国规定了禁止酒后驾车和醉酒驾车的条文和处罚办法,但由于不同地区不同人群对乙醇的吸收和代谢存在差异,所以给实际工作带来了困难,有些学者对这些标准的合理性和适用性提出过质疑,随着有关研究的深入,判断标准正在不断地被修订和补充。另外,饮酒还可导致肝脏、胰腺等脏器发生病理改变,成为原来患有高血压、冠心病、脑出血等心脑血管疾病的死亡诱因,醉酒状态下容易引发斗殴伤害案件,过量饮酒还可直接导致死亡。因此,进一步研究乙醇对行为学的影响及其机制,具有较高的法医学意义及临床意义。
方法:
1分别按4ml/kg、8ml/kg、16ml/kg的乙醇/体重比对大鼠进行灌胃,制作低、中、高剂量急性乙醇中毒模型,对照组给予相应体积的生理盐水。2通过福尔马林实验观察大鼠在不同浓度乙醇及时间作用下行为学的改变。3采用免疫组织化学技术检测不同剂量乙醇作用下大鼠下丘脑和脊髓P物质(substance PSP)的表达。4采用普通光镜和扫描电镜观察大鼠下丘脑和脊髓组织和细胞的微观形态学变化。5统计学处理采用SPSS10.0软件包进行统计分析,计量资料数据以均数±标准差((x)±s)表示,符合正态分布和方差齐时组间比较采用单因素方差分析、LDS~t检验,非正态分布和方差不齐时采用非参数检验,相关性分析采用Pearson检验,检验水准为a=0.05。
结果:
1.大鼠行为学的改变:4ml/kg组在灌胃后15-30min内舔足次数最多;8ml/kg组在灌胃后45-60min舔足次数最多,醉酒症状明显;16ml/kg组在灌胃后0-2h内舔足次数始终维持在一个较低水平,醉酒症状最明显;对照组则无明显的时间差异。随着时间的推移,各剂量组舔足次数在灌胃2h左右基本处于同一水平。
2.大鼠中枢神经组织HE染色变化:对照组和4ml/kg组脑组织病理变化不明显;8ml/kg组变化较明显,可见脑实质内血管扩张、充血,神经细胞周围及小血管周围腔隙增宽;16ml/kg组变化最明显,脑实质内血管扩张、充血,神经细胞周围及小血管周围腔隙增宽明显,胞浆淡染,个别区域内有散在的红细胞。
3.SP在大鼠下丘脑和脊髓神经细胞的表达:各组别均有SP的表达,对照组和4ml/kg组之间、8ml/kg组和16ml/kg组之间均没有统计学意义,但对照组和4ml/kg组SP表达较弱,与8ml/kg组、16ml/kg组相比均有统计学意义(P<0.05)。
4.扫描电镜下大鼠下丘脑及脊髓的形态学观察:16ml/kg组大鼠的下丘脑和脊髓都有不同程度的水肿,细胞间隙增宽,神经元轴突与髓鞘之间间隙增宽,部分神经元与周围神经细胞的突触连接减少;偶有散在红细胞出现;8ml/kg组也有部分上述表现,但程度较轻;对照组和4ml/kg组未见明显异常。
结论:
1.急性乙醇中毒可引起大鼠疼痛功能障碍,其程度与乙醇浓度有关,同时与作用时间也有密切关系;相同乙醇浓度灌胃后,大鼠舔足次数在不同的时间也有差异。
2.乙醇可诱导神经细胞中SP的表达,其表达强度与乙醇浓度有关,同时也与乙醇作用时间有一定的关系。
3.光镜和扫描电镜下各组大鼠下丘脑及脊髓的形态学变化比较明显: