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近来的医学研究发现,许多多糖经硫酸化修饰以后,获得了或增强了某些生物活性,尤其是抗病毒和增强免疫活性,这显示了广阔的药用前景。当归自古至今一直被中医广泛用于多种疾病的治疗,素有“十方九归”之称。当归多糖作为其主要组份之一,具有抗血栓、免疫调节、抗肿瘤等作用。本研究选择当归多糖作为研究对象,进行提取、纯化和硫酸化修饰,并比较了4种硫酸化当归多糖的体外抗病毒活性。研究分为以下三部分。试验一当归多糖的提取分离和纯化用水煎醇沉法提取当归总多糖(CAPS),以多糖得率为指标,用正交设计对提取温度、料水比和提取时间进行优选。结果显示,最佳提取条件为100℃、料水比1：20、提取时间30min×2。对提取的CAPS用Sevage法去蛋白,Sephadex G-200凝胶层析分离,得到两个分级组份CAPS1和CAPS2。CAPS2的得率和糖含量分别为48.56%和97.1%、高于CAPS1的9.93%和85.2%,蛋白含量为0.2%、低于CAPS1的1.0%,因此将其作为下一步硫酸化修饰的材料。试验二当归多糖的硫酸化修饰以CAPS2为原料,用氯磺酸-吡啶法对当归多糖进行硫酸化修饰。用响应面法研究了修饰条件中反应温度(A)、反应时间(B)和氯磺酸-吡啶比例(C)三个因素对产物的硫酸基取代度的影响,建立回归模型,验证了其有效性,并分析了主效应和因素交互作用。结果表明,在A为65-95℃、B为60-180min、C为1：3-14.3范围内,三个因素与产物平均取代度(Y)的回归模型为Y=2.74+0.66×A+0.66×B+0.80×C+0.51×A×B-0.31×A×C-0.16×B×C-0.34×A2-0.23×B2-0.50×C2。共得到17种取代度在0.1230-4.0753范围内的硫酸化当归多糖,为下一步研究硫酸化当归多糖的体外抗病毒活性提供了材料。试验三硫酸化当归多糖体外抗新城疫病毒活性比较选取取代度分别为1.28、1.77、2.41、3.22的硫酸化当归多糖,在测定安全浓度的基础上,用MTT法比较了它们的体外抗病毒作用,以未修饰的当归多糖为对照。结果表明,硫酸化修饰能使当归多糖获得本来不具有的抗病毒活性。取代度为3.22的硫酸化当归多糖具有显著的抗NDV感染鸡胚成纤维细胞的作用,有效浓度在0.1954-0.7813μg·mL-1范围内。