盐胁迫下拟南芥突变体sos2中活性氧的产生以及AtMCA基因功能的研究

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植物在盐胁迫下会产生并积累活性氧导致氧化胁迫。活性氧对核酸、蛋白、膜造成伤害。有效地控制活性氧的产生和清除机制,并对它造成的伤害进行及时的修复,是植物在盐胁迫继续生存的重要保障。 sos2是近年来鉴定出的盐超敏感突变体,SOS2基因编码的是一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。已有的研究表明sos2突变体对盐敏感是由于Na~+/H~+反向转运器活性降低造成,而活性氧是否也作为它对盐敏感的原因之一还未见报道。本研究利用DAB、NBT染色以及DCFH-DA荧光检测方法,分别测定了盐胁迫下野生型和sos2突变体的叶片和根中ROS的含量。实验结果表明,盐胁迫下sos2突变体与野生型相比积累了更多的活性氧。这证明ROS是sos2对盐敏感的原因之一。 近年来的研究表明植物中含有一类AAA蛋白酶——FtsH金属蛋白酶,它们参与了多种重要的细胞过程,如蛋白的折叠,非组成型多肽的降解等。在酵母上的研究表明这类蛋白参与了细胞色素氧化酶亚基的装配,从而调控了细胞色素氧化酶的活性。拟南芥线粒体中存在三个编码FtsH金属蛋白酶的基因,分别命名为FtsH3,FtsH4和FtsH10。这三个基因的功能还未见报道。我们曾克隆了FtsH3基因,并且命名为AtMCA (Mitochondrial Cytochrome oxidase-related AAA-ATPases of Arabidopsis)。 本实验室原来的研究结果表明盐胁迫下sos2突变体中AtMCA基因的表达受抑制。在本研究中我们发现,sos2突变体中细胞色素氧化酶活性与野生型相比降低。而超表达AtMCA基因sos2突变体植株中,细胞色素氧化酶的活性得到提高,并且转基因植株对盐的耐受性也提高。这表明线粒体AAA蛋白酶参与调控细胞色素氧化酶活性,从而提高植株对盐胁迫的适应性。
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