论文部分内容阅读
本实验首先通过临床症状观察、病理学检查、血清学检测、病原分离鉴定及鸡腺胃型IBV人工感染鸡对两个疑似患腺胃型传染性支气管炎(infectiousbronchitis,IB)的鸡群进行了综合诊断。诊断结果表明:两个发病鸡群均表现有消化道症状;腺胃炎等病变特征;传染性支气管炎病毒(infbctiousbronchitisvirus,IBV)的分离鉴定具有证病意义。本实验进行了鸡腺胃型IBV人工感染鸡试验,通过临床症状观察及病理学检查和病毒抗原检测,为鸡腺胃型IB的防制提供病理学理论基础。试验用腺胃型IBV分离毒可致感染鸡发病、死亡。病理学检查结果表明:在感染早期,腺胃病变较轻;而到后期,腺胃病变逐渐显著,表现为腺胃肿大,壁增厚,腺胃固有层和(或)腺体内出现数量不等的淋巴细胞增生,而对照组鸡腺胃未见病理变化,说明腺胃是病毒性腺胃炎的一个重要的靶器官。本试验最早可从感染后第2d鸡的腺胃黏膜上皮细胞及复管腺上皮细胞中检测到病毒抗原,在感染后第35d的腺胃中仍能检测到病毒抗原,表明该腺胃型IBV可在感染的早期进行复制,并持续较长时间;进一步说明腺胃型IBV具有在鸡腺胃内长时间复制的潜力。综合判定两个发病鸡群所患疾病为腺胃型传染性支气管炎。
最后用RT-PCR的方法成功地扩增了分离毒CZ-1、CZ-2株的膜蛋白基因(M基因)全长片段,测序获得了2个分离毒株M基因的全长核苷酸序列:其M基因均由681nt的核苷酸组成,均编码226个氨基酸。将其与GenBank中注册的19株IBV的M基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比较、系统进化关系分析发现:2株腺胃型IBV分离毒之间的核苷酸序列同源性为100%,其相应的氨基酸序列同源性为100%;分离毒与19个参考毒株M基因核苷酸序列同源性为86.8%~93.0%,其相应的氨基酸序列同源性为87.5%~96.1%;其中2株腺胃型IBV分离毒株与肾型IBVBJ株、腺胃型IBVQX株和肾型IBVCK/CH/LSHHI/03株的亲缘关系较近;而与IBVCU-T2株的亲缘关系最远。