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松木层孔菌(Phelinus pini)是一种珍贵的药用真菌,隶属于担子菌门,层菌纲,锈革孔菌目,锈革孔菌科,针层孔菌属。国内外研究表明针层孔菌属真菌多糖普遍具有抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、免疫调节等活性。与同属的其他针层孔真菌相比,目前有关松木层孔菌多糖的研究报道相对较少。本论文以松木层孔菌子实体为研究对象,对松木层孔菌子实体多糖的分离纯化、理化性质、结构表征以及体外活性进行了较系统的研究,旨在为其医药保健产品的研发利用提供参考。本论文主要分为松木层孔菌子实体多糖的提取分离和体外生物活性研究、多糖的分离纯化及理化性质研究、多糖的结构表征三部分内容。结果如下:(1)松木层孔菌子实体粉末经95%乙醇脱脂预处理后,经沸水反复浸提得到多糖粗提液,再经乙醇分级醇沉得到3个粗多糖组分:PP30、PP60和PP80。并对3个组分进行了体外清除DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基及FRAP总抗氧化能力测定和体外抑制α-葡萄糖苷酶活性研究。4种抗氧化实验结果表明相互间具有较好的一致性,三种粗多糖抗氧化活性强弱均为:PP80>PP60>PP30。体外抑制α-糖苷酶活性研究也发现在实验浓度范围内,活性强弱依次为PP80>PP60>PP30。根据体外活性的实验结果选择PP80组分用于进一步的分离纯化。(2)粗多糖组分PP80经DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析后得到两个主要组分:PP80W(蒸馏水洗脱)和PP80S(0.1 mol/lNaCl溶液洗脱)。PP80W再经Sephacryl S200凝胶层析得到一主要组分PP80W-1。PP80W-1经高效液相色谱(HPLC)检测为均一性组分,其平均分子量为3.2x103Da。紫外全扫描分析表明PP80W-1不含蛋白质,但含有微量的核酸。红外光谱分析表明PP80W-1是不含糖醛酸的中性多糖。(3)采用气相色谱(GC)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)和核磁共振分析谱(1D NMR和2D NMR)等方法对均一组分PP80W-1进行结构表征。PP80W-1经酸水解、还原、乙酰化后,GC分析表明单糖组成为D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖及少量的L-鼠李糖,同时进一步发现还含有3-O-甲基-D-半乳糖。PP80W-1的多糖残基通过红外光谱、甲基化和核磁共振分析表明主要含1,6-linked Glcp、1,3-linkedGlcp、1-linkedGlcp、1-linkedGalp、1,6-linked3-O-MeGalp、1,3,6-linked Manp、1,4-linked Manp 和 1-linked Rhap残基。其中→6)-β-D-Glcp-(1→和→3)-α-D-Glcp-(1→为主要键型,可能构成主链;→3,6)-α-D-Manp-(1→为分支链;端基主要由 β-D-Glcp-(1 →组成并含有少量β-D-Galp-(1→。同时结构中还含有→6)-α-3-O-Me-D-Galp-(1→、→4)-α-D-Manp-(1 →和少量的 α-L-Rhap-(1 →残基。