酵母降解对苯二甲酸废水及资源化研究

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对苯二甲酸(TA)被广泛用于涂料、胶粘剂、塑料薄膜、增塑剂和染料等生产行业,是一种重要的工业化学品。TA具有毒性,对一些动物有三致效应,被美国环保局(EPA)列为优先控制的污染物之一,我国己建和拟建的TA生产装置总生产能力每年将达两百余万吨,排放的含TA废水需要得到有效的治理。 利用微生物降解的方法处理含TA废水是一种经济有效且无二次污染的方法,国内外一般以细菌为研究对象处理TA废水。本试验以对苯二甲酸废水为研究对象,考察不同环境条件对筛选到的高效酵母菌EM02影响,分析了胞内海藻糖的作用和TA降解机理,根据酵母和细菌单独处理的优缺点设计了复合降解工艺,考察了该工艺对TA和COD的去除能力和不同氮源的影响,并进行了资源化利用的可行性与安全性研究。 通过半连续驯化,从对苯二甲酸活性污泥中分离到一株需以葡萄糖为初级碳源共代谢降解TA的酵母菌EM01,经鉴定为假丝酵母(Candida),经过两次紫外诱变后,获得了以TA为唯一碳源生长并高效降解TA的菌株EM02,通过SDS-PAGE证实了紫外诱变前后酵母酵母细胞的基因表达发生了变异。该菌对TA有很强的降解能力,耐受TA起始浓度高,能以TA为唯一碳源,EM02在30℃,pH5.5~8,振荡速率150r/min的培养条件下,72h内对1400mg/L的TA降解率可达80%以上。溶解氧和接种量对TA降解能力影响不大。酵母EM02沉降性能好,菌体可用于生产单细胞蛋白,实现废物的资源化。 细胞内高含量的海藻糖能保护生物抵御伤害,增强生存能力,还能抵御冲击负荷,保护细胞活性和降解酶活性。海藻糖含量随渗透压的增大而增大,是一种渗透压保护剂,经过5%NaCl的预培养后,与未经预培养的细胞比较细胞内海藻糖含量提高了接近三倍。同时TA浓度越高,相应海藻糖含量也越高.在1000mg/L的TA中海藻糖-6-p合成酶的酶活比空白对照(0mg/LTA)中提高了接近6倍。因此高浓度的TA能提高海藻糖—6—磷酸合成酶活性,使细胞迅速积累海藻糖,提高菌体对TA的耐受能力并保护TA降解酶活性,保证TA降解的进行。EM02降解TA过程中胞内海藻糖代谢与TA的降解关系的研究对进一步提高降解率和缩短降解时间有着重要作用。 反相高效液相色谱法研究证明原二茶酸是对苯二甲酸降解的主要中间产物。诱导原二茶酸降解酶是降解的限速反应步骤。 由于酵母降解出水水质达不到排放标准,而细菌不能耐受较高的TA起始浓度,为了能够有效去除水中TA并且实现废物利用资源化,依据TA降解的机理我们设计了利用酵母菌前处理完成该限速步骤,然后再由TA降解细菌进一步处理的工艺,试验表明复合处理TA降解率和COD去除率比酵母和细菌单独处理去除率要高。以NH4Cl和KNO3为氮源TA降解率和COD去除率均可以达95%,出水COD能达到国家二级排放标准。以NH4Cl为氮源可以获得最大酵母菌体生物量,因此氨态氮NH4Cl是处理废水以及获取单细胞蛋白的最佳氮源。 氨基酸自动分析仪分析了单细胞蛋白的氨基酸组成,共检测出17种氨基酸,氨基酸组成好,种类齐全,其中包括7种人体必须氨基酸,总必需氨基酸与总氨基酸的比值为37%,说明本试验获得的单细胞蛋白具有较高的营养价值。毒理学试验表明该单细胞蛋白无急性毒性、无积蓄毒性、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果为阴性,表明无致突变性,适合作为动物饲料和饲料添加剂使用。
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