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目的：探讨纳米氧化锌对ECV304细胞的损伤作用和通过ROS途径诱导细胞凋亡机制，以及抗氧化剂a-硫辛酸对其诱导的ECV304细胞线粒体损伤的保护作用。
方法：为观察纳米ZnO颗粒对ECV304细胞的损伤及凋亡机制，将不同浓度的纳米氧化锌作用于ECV304细胞24h，终浓度为(25、50、100、200、400 ug/mL)，用龙胆紫染色在倒置显微镜下观察细胞吞噬；MTT法检测细胞抑制率；透射电镜观测细胞凋亡和坏死；使用LDH试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)含量。琼脂糖凝胶电泳实验(DNA ladder)检测细胞凋亡：黄嘌呤氧化酶法检测细胞培养上清液中SOD活性，硫代巴比妥酸法检测氧化产物MDA含量，DCFH-DA荧光探针法测定ROS含量。为观察a-硫辛酸(LA)对的纳米ZnO颗粒诱导的ECV304细胞损伤的保护作用，将LA溶剂分别加入纳米ZnO各组，使纳米ZnO各组的终浓度为(25、50、100、200、400 ug/mL)，LA终浓度为(1 10、II 50、III 100umol/L)。培养24h后，采用MTT法检测细胞抑制率；利用可见光分光光度计测定各组超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)的含量。利用荧光分光光度计测定活性氧(ROS)含量并进行统计学分析。
结果：纳米氧化锌可抑制细胞增殖活性，并具有剂量依赖性；ZnO纳米颗粒通过吞噬方式进入ECV304细胞：MTT实验表明，纳米ZnO颗粒对ECV304细胞的生长活性具有明显的抑制作用，存在剂量-效应关系；电镜结果显示：纳米氧化锌导致细胞体积缩小，细胞膜绒毛缺失染色质聚集、核固缩和核碎裂，细胞膜出现局灶型溶解线粒体嵴结构紊乱和空泡样改变，出现细胞凋亡，随着纳米氧化锌浓度的增加，凋亡逐渐减少，坏死逐渐增加等；使用LDH试剂盒检测得培养液上清中乳酸脱氢酶活性显著升高(P<0.05)。纳米氧化锌使ROS含量增加，抑制细胞抗氧化酶SOD活性，使氧化产物MDA生成增加，与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。加入a-硫辛酸后，各个试验结果(MTT、LDH、MDA、ROS)均有不同程度改善，与对照组相比差异有统计学意义（P<.05）。
结论：纳米氧化锌可以抑制ECV304细胞的活性，诱导细胞凋亡，产生细胞毒性，通过ROS途径诱导细胞凋亡。LA通过增加SOD、MTT含量，减少LDH、MDA、ROS生成，有效抑制纳米ZnO颗粒对ECV-304细胞的损伤作用。