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心肌炎主要是由柯萨奇B组病毒等嗜心性病毒感染引起的心血管系统的常见病，心肌病理主要表现为心肌灶性坏死、纤维化和大量单个核细胞浸润。目前已明确，病毒感染对心肌细胞的直接损伤是短暂的，受损心肌细胞释放的肌凝蛋白等物质作为自身抗原，引起进一步的心肌细胞自身免疫损伤。用纯化心肌肌凝蛋白或人工合成心肌肌凝蛋白重链的片段（如：aa735-747，aa947-960）加佐剂均可以诱导易感动物出现典型的心肌炎病理改变。由于肌凝蛋白诱导的实验性自身免疫性心肌炎具有与病毒性心肌炎慢性阶段相似的病程和免疫学改变，故目前主要利用实验性自身免疫性心肌炎作为研究心肌自身免疫损伤的模型。我们采用差速离心、硫酸铵分级沉淀、离子交换层析等方法从猪心肌提取了肌凝蛋白，经SDS-PAGE和Western blot 鉴定证实提纯蛋白中主要为肌凝蛋白α重链。将纯化肌凝蛋白加入福氏完全佐剂免疫Balb/c小鼠，18－21天间出现不同程度的心肌炎病理改变，并伴有血浆cTnI水平升高，阳性率≥87.5％。免疫学检查发现肌凝蛋白免疫小鼠血浆出现高滴度的肌凝蛋白抗体，血浆TGF-β1水平显著低于正常对照组。免疫组小鼠脾脏和外周血TCRVβ8.1&8.2阳性T淋巴细胞明显高于对照组小鼠，但CD3＋CD4＋、CD3＋CD4＋和TCRVβ10阳性T淋巴细胞百分率两组小鼠无明显差异。根据文献报道心肌肌凝蛋白诱导Balb/c小鼠发生自身免疫性心肌炎的主要免疫表位位于肌凝蛋白α重链aa730－960。我们采用RT-PCR等方法从幼龄大鼠心肌扩增出包含该表位的681bp（2234-2914）肌凝蛋白重链基因片段，进一步构建与IL-2 N末端的信号肽基因连接，形成肌凝蛋白重链基因片段与IL-2信号肽的融合蛋白（IL-2-myosin），构建了表达该融合蛋白的逆转录病毒载体。经RT-PCR、Dot-blot、免疫组化、免疫电镜等方法证实肌凝蛋白α重链基因片段可在IL-2信号肽引导下分泌表达。<WP=6>采用细胞共培养的方法使逆转录病毒感染骨髓细胞。取正常4－6周雄性Balb/c小鼠作为供体，腹腔内注射5-Fu 150mg/kg。3天后分离小鼠四肢骨骨髓细胞，加入0.17mol/L NH4Cl 5ml裂解红细胞，收集有核细胞，以含10％小牛血清的RPMI1640培养，内含10ng/ml 的SCF、IL-6、IL-3以促进细胞增殖。48h后，将骨髓细胞移入PA317细胞培养瓶内，以含4ug/ml polybrene的10％RPMI1640培养基继续培养48h。经逆转录病毒感染的骨髓细胞移植给经亚致死剂量（6Gy）照射的正常Balb/c小鼠，同条件移植空载体病毒感染骨髓细胞的小鼠作为对照组，同时设立单纯免疫对照组（未照射、未移植）。8周后，以肌凝蛋白加佐剂免疫各组小鼠，第一次免疫后18天处死小鼠。结果显示，经肌凝蛋白基因转移实验组小鼠心肌炎病理损害程度较转基因对照组和单纯免疫组明显减轻，血浆肌钙蛋白I阳性率明显下降，外周血和脾脏单个核细胞Th1/Th2明显降低，脾脏单个核细胞经肌凝蛋白刺激后分泌IFN-γ水平明显下降、分泌IL-4明显增强。转基因实验组鼠脾脏单个核细胞对肌凝蛋白刺激的增殖能力明显低于转基因对照组和单纯免疫组。上述结果表明，重组逆转录病毒介导的肌凝蛋白骨髓细胞基因转移后，可能在多能干细胞定向分化等过程中，通过使机体对肌凝蛋白自身反应性T细胞的克隆失活、免疫偏离机制，诱导机体产生对肌凝蛋白不同程度的特异性免疫耐受，预防或减轻实验性自身免疫性心肌炎的发生。这对于自身免疫性心肌炎的防治是一个新的探索。