【摘 要】
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目的:探讨环状 RNA002184（circular Ribonucleic Acid,circRNA002184）在转化生长因子 β1（transforming growth factor-beta,TGF-β1）诱导活化的肝星形细胞（Hepatic Stellate Cell,HSC）及其分泌的外泌体（exosome）中的表达情况。方法:TGF-β1体外诱导人肝星形细胞株LX-2细胞建立HSC
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目的:探讨环状 RNA002184（circular Ribonucleic Acid,circRNA002184）在转化生长因子 β1（transforming growth factor-beta,TGF-β1）诱导活化的肝星形细胞（Hepatic Stellate Cell,HSC）及其分泌的外泌体（exosome）中的表达情况。方法:TGF-β1体外诱导人肝星形细胞株LX-2细胞建立HSC体外活化模型,分为对照组、48小时组和72小时组三组,常规培养、加入15ng/ml TGF-β1培养48小时和15ng/ml TGF-β1诱导72小时组,显微镜下观察HSC形态的变化。采用蛋白质印迹法检测TGF-β、平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的表达。通过透射电镜分析的HSC分泌的exosome,并采用蛋白印迹法检测HSC来源的exosome CD63、CD81表面标记蛋白。通过定量PCR检测HSC来源的exosome内circRNA002184的表达及 HSC 的 miRNA411-3P（micro Ribonucleic Acid,miRNA411-3P）和核因子 I/B（Nuclear factor IB,NFIB）的表达变化。结果:TGF-β1诱导48小时,约50%的LX-2细胞变长呈短梭形,诱导72小时,95%以上的LX-2细胞更细长突触增多呈长梭形,形态向成纤维样细胞转变。检测HSC活化相关蛋白的表达发现,与对照组相比,TGF-β1诱导72小时,LX-2细胞中α-SMA表达明显升高。活化的HSC及其分泌的exosome中circRNA002184表达升高（P＜0.05）。活化的 HSC 中 miRNA411-3P 表达降低（P＜0.05）,NFIB 表达升高（P＜0.05）。结论:TGF-β1诱导活化的HSC及其分泌exosome中circRNA002184水平升高,活化的HSC的miRNA411-3P水平降低,NFIB表达升高。
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