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目的:研究莪黄汤保留灌肠对人结肠癌SW480移植瘤survivin表达及其临床意义,进一步深入研究“莪黄汤”的对抗结肠癌的可能作用机制。从而为确立“莪黄汤”临床有效用药提供一定的实验依据和临床参考。
方法:以人结肠癌细胞株SW480在BALB/c小鼠皮下注射建立实体瘤模型。成瘤后切除瘤块选用淡黄色或呈鱼肉状瘤组织。采取将癌组织块缝合于大鼠盲肠壁浆膜面,造成SW480结肠癌移植瘤模型。术后肌注4万单位青霉素钠防止感染三天。术后所有大鼠暂时分笼饲养至完全清醒,给予正常饮食。将大鼠按照随机数字表分组法共分为5组:A组模型对照组、B组阳性对照组、C组莪黄汤大剂量组、D组莪黄汤中剂量组、E组莪黄汤小剂量组。模型建立后,A组大鼠给予生理盐水灌肠,B组腹腔注射5-FU,C、D、E组大鼠分别按照大中小剂量给予“莪黄汤”保留灌肠,每组均连续给药14天后处死各组大鼠,解剖并取出完整瘤块,计算瘤重、抑瘤率、脾脏指数和胸腺指数,应用免疫组化SP法分析移植瘤组织中Survivin的测定,统计分析实验数据,探讨中药复方制剂莪黄汤对人结肠癌SW480移植瘤生长及抑瘤的影响,并初步探讨其作用机制。
结果:
1.莪黄汤对SW480移植瘤大鼠的一般生存情况的影响。
莪黄汤各剂量组大鼠体重、日进食量、进水量及活跃度逐渐增加。说明能改善大鼠的一般生活状况,提高生存质量。
2.莪黄汤对SW480移植瘤大鼠瘤重、抑瘤率的影响。
莪黄汤各组的瘤重均较模型组低,莪黄汤大、中、小各剂量组的抑瘤率分别是28.57%、21.11%、16.77%。
3.莪黄汤对SW480移植瘤大鼠胸腺指数及脾脏指数的影响。
结果显示:莪黄汤各剂量组大鼠胸腺指数及脾脏指数较高。与阳性对照组(5-FU组)相比,莪黄汤各剂量组大鼠胸腺指数及脾脏指数亦显著升高,有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组相比较,阳性对照组大鼠胸腺及脾脏指数显著降低,差异具有显著性(P<0.05)。说明莪黄汤能够促使大鼠的胸腺、脾脏生长,能提高机体的免疫功能。
4.莪黄汤对SW480移植瘤大鼠survivin的表达。
与模型组比较,莪黄汤大剂量组、阳性对照组表达survivin阳性细胞率均明显下降,而且莪黄汤大剂量组与阳性对照组在影响SW480移植瘤大鼠表达survivin相近,无显著性差异。
结论:莪黄汤保留灌肠对人结肠癌SW480移植瘤细胞生长有明显的抑制作用,具有确切的肿瘤抑制作用,能够提高机体抗肿瘤能力。其作用可能与改变肿瘤组织survivin的表达,促进肿瘤细胞凋亡,改善大鼠的生存状况,从而达到抗肿瘤的目的。为今后的实验研究提供依据。