重组人脑利钠肽与呋塞米应用于射血分数降低的心衰大鼠利尿效果影响及其机制

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目的:通过测定射血分数降低的心衰(Heart failure with reduced ejection fraction,HFrEF)大鼠肾脏水通道蛋白2(aquaporin-2,AQP2)表达及尿AQP2浓度,探讨重组人脑利钠肽(Recombinant human brain natriuretic peptide,rhBNP)与呋塞米应用于HFrEF大鼠利尿效果的影响及其机制,为临床应用rh BNP改善呋塞米利尿效果提供理论依据。方法:通过结扎雄性Wistar大鼠左前降支,建立急性心肌梗死后HFrEF模型。手术4周后存活大鼠动物超声检测,射血分数(Ejection Fraction,EF)<55%,提示建模成功。建模成功的大鼠随机分为模型组,rhBNP组,呋塞米组,rhBNP+呋塞米组,另设假手术组。干预4周采集血、尿标本,记录24h出入量(干预2周、4周)。检测血浆血管紧张素II(Angiotensin II,AngII)、醛固酮(Aldosterone,ALD)、血管加压素(Arginine vasopressin,AVP)、N末端脑利钠肽前体(N-terminal pro brain natriuretic peptide,NT-pro BNP)、尿AQP2、尿肌酐。干预4周后动物超声检测,评估心功能。应用免疫组织化学、Western blot、RT-PCR检测肾脏AQP2表达。结果:1.大鼠血浆AngII,ALD,AVP,NT-pro BNP浓度:干预4周,rhBNP组、rhBNP+呋塞米组低于模型组、呋塞米组(P<0.05),高于假手术组(P<0.05);前三个指标比较,呋塞米组高于模型组(P<0.05),rhBNP组与rhBNP+呋塞米组没有统计学差异(P>0.05)。最后一个指标比较,rhBNP组与rhBNP+呋塞米组、呋塞米组与模型组没有统计学差异(P>0.05)。2.大鼠尿液AQP2排泄率(AQP2浓度/肌酐):干预4周,rhBNP组、rhBNP+呋塞米组低于模型组、呋塞米组(P<0.05),高于假手术组(P<0.05),呋塞米组高于模型组(P<0.05),rhBNP组与rhBNP+呋塞米组没有统计学差异(P>0.05)。3.大鼠24h出入量差值:干预2周,呋塞米组、rhBNP+呋塞米组多于rhBNP组(P<0.05),呋塞米组与rh BNP+呋塞米组比较没有统计学差异(P>0.05)。前三组多于假手术组、模型组(P<0.05),假手术组多于模型组(P<0.05)。干预4周,rh BNP+呋塞米组多于rhBNP组、呋塞米组(P<0.05),呋塞米组多于rhBNP组(P<0.05)。前三组多于假手术组、模型组(P<0.05),假手术组多于模型组(P<0.05)。4.干预4周大鼠超声:左室舒张末内径(Left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)、左室收缩末内径(Left ventricular end systolic diameter,LVESD)比较,rhBNP组、rhBNP+呋塞米组低于模型组、呋塞米组(P<0.05),高于假手术组(P<0.05),rh BNP组与rhBNP+呋塞米组、呋塞米组与模型组没有统计学差异(P>0.05);EF、短轴缩短率(Fractional shortening,FS)比较,rhBNP组、rhBNP+呋塞米组高于模型组、呋塞米组(P<0.05),低于假手术组(P<0.05);rh BNP组与rhBNP+呋塞米组、呋塞米组与模型组没有统计学差异(P>0.05)。5.干预4周大鼠肾脏AQP2、AQP2 mRNA表达:rhBNP组、rhBNP+呋塞米组低于模型组、呋塞米组(P<0.05),高于假手术组(P<0.05);呋塞米组高于模型组(P<0.05),rhBNP组与rhBNP+呋塞米组没有统计学差异(P>0.05)。结论:rhBNP联合呋塞米应用于HFrEF大鼠,rh BNP通过拮抗神经内分泌系统过度激活、降低尿AQP2排泄率及肾脏AQP2表达,减少肾小管水钠重吸收,增强呋塞米利尿效果,减轻液体潴留,改善心功能。
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