论文部分内容阅读
目的:借助C3A永生化肝细胞实验平台，研究N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)对慢性重型肝炎肝衰竭时肝细胞解毒代谢功能的影响，并比较NAC及还原型谷胱甘肽(reduced glutathione，GSH)的疗效。
材料与方法:收集正常健康人血浆(normol human plasma，NHP)12份，慢性重型肝炎患者血浆(chronic severe hepatitis plasma，CSHP)12份。C3A细胞来自于首都医科大学附属北京佑安医院人工肝中心细胞生物研究室。NAC及GSH原料由杭州民生药业公司提供。
慢性重型肝炎患者血浆培养C3A细胞，并同时分别加入大中小三个剂量(25mmol/l，5mmol/l，1retool/l)NAC及对应剂量的GSH，以12份正常血浆及12份培养基培养C3A细胞作为对照，共设培养基组、正常血浆组、慢重肝血浆组、慢重肝血浆+小剂量NAC组、慢重肝血浆+中剂量NAC组、慢重肝血浆+大剂量NAC组、慢重肝血浆+小剂量GSH组、慢重肝血浆+中剂量GSH组、慢重肝血浆+大剂量GSH组九组，分别于24小时、48小时、72小时3个时间点MTT法测定C3A细胞活力，检测细胞内GSH及脂质过氧化物(MDA)含量及安定代谢量的变化。
结果:
(1)C3A细胞在培养基和正常血浆中生长良好，在慢重肝血浆中增殖更加旺盛。同一时间点，培养基组和正常血浆组的C3A细胞内GSH含量和细胞安定代谢量大致相同，而慢重肝血浆组中C3A细胞内GSH含量和细胞安定代谢量显著低于前两组。正常血浆组MDA含量高于培养基组，而慢重肝血浆组中细胞内MDA含量显著高于前两组。以上结果均有统计学意义(P<0.01)。
(2)同一时间点，在慢重肝血浆中加入NAC/GSH都可以使细胞增殖活力进一步增高。慢重肝血浆+不同剂量NAC/GSH组细胞内GSH含量和细胞安定代谢量均明显高于慢重肝血浆组，细胞内MDA含量均明显低于慢重肝血浆组，有显著差异(P<0.01)。
(3)NAC和GSH作用呈一定剂量依赖性。同一时间点，NAC/GSH剂量越高，细胞内GSH含量和细胞安定代谢量越高；NAC/GSH剂量越高，细胞内MDA含量越低，有统计学意义(P<0.01)。
(4)同一时间点，慢重肝血浆+NAC/GSH组相对应剂量相比较，对应剂量NAC组细胞内GSH含量和细胞安定代谢量均明显高于GSH组，细胞内MDA含量均明显低于GSH组，有显著差异(P<0.01)。
结论:
(1)慢重肝血浆抑制C3A细胞的解毒代谢功能，使细胞内GSH含量下降、MDA含量增加，细胞的安定代谢量降低。但细胞在慢重肝血浆中增殖旺盛。
(2)在慢重肝血浆中加入NAC/GSH均可以提高细胞内GSH含量，降低细胞内MDA含量，降低细胞脂质过氧化程度，减轻细胞受自由基攻击的程度，发挥明确的抗过氧化损伤作用，并能够提高慢重肝血浆培养C3A细胞的安定代谢量，改善细胞的解毒代谢功能。并且可使细胞增殖活力进一步增高。
(3)NAC/GSH改善C3A细胞的解毒代谢功能在一定程度上呈剂量依赖性，剂量越高效果越好。
(4)在上述各方面，相同摩尔剂量的NAC作用明显优于GSH，提示在重肝肝衰竭时NAC治疗更利于补充内源性GSH损耗并增强细胞解毒代谢能力。