普通小麦—华山新麦草人工合成双二倍体杂交衍生后代的分子细胞遗传学研究

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小麦是世界上最重要的粮食作物之一,其总产量居世界第一。随着世界人口的持续增长、人民生活水平的提高以及全球气候的不断变化,使得小麦遗传改良的目标越来越趋向多样化。然而,在现代农业体系下,普通小麦品种遗传基础狭窄,远远不能满足人们的需要。普通小麦的野生近缘植物中,蕴藏着丰富的、对小麦品种遗传改良具有重要利用价值的有益基因,如:高产、优质、抗病、抗虫、抗逆等。通过小麦远缘杂交人工合成双二倍体,并利用其作为桥梁材料与栽培小麦品种杂交和回交,可以将野生植物的优良基因有效地转移至栽培品种,从而丰富栽培品种的遗传基础。本研究主要从形态学标记、细胞学标记、生化标记、分子标记和抗条锈病调查等方面对普通小麦-华山新麦草双二倍体(PHW-SA)×川麦107和PHW-SA XJ-11的衍生后代(F2和BC1F1)进行研究。主要研究结果如下:1、形态学研究表明:在F2和BC1F1中,植株平均株高变幅大,p值为0.0001,差异极显著,介于两亲本之间或者高于两亲本;平均分蘖数多于或者介于两亲本之间,p值为0.0231,差异显著;平均穗长介于两亲本之间或者短于两亲本,p值为0.0001,差异极显著;平均旗叶长长于、短于和介于两亲本之间的均存在,p值为0.1417,差异不显著;平均每穗小穗数少于或者介于两亲本之间,p值为0.3336,差异不显著。结果表明该衍生后代群体遗传不稳定,遗传变异丰富。2、小麦白粉病、赤霉病调查在自然发病条件下进行,无发病植株。3、根尖细胞染色体观察表明:F2和BC1F1的体细胞染色体数变化范围为42~48,平均染色体数为43.9。其中,以染色体数为42和44的居多,分别占27.8%和44.4%。结果表明F:和BC1F1植株染色体数的丢失程度不同,说明回交能够较快的削减后代的染色体数。4、花粉母细胞减数分裂观察结果表明:在F2和BC1F1中,每个细胞的平均单价体变幅在0.06~5.10之间;平均二价体变幅在20.42~22.23之间,其中,环状二价体变幅在15.77~21.06之间,棒状二价体变幅在0.94~3.68之间;平均三价体变幅在0.06~0.11之间。不同染色体数目的植株,其染色体配对情况不同,材料编号为143和138的植株染色体数为42,它们每个细胞的平均单价体较少,分别为0.06和0.12。而一些染色体数目相同的不同植株中,每个细胞的染色体配对情况也明显不同。在染色体数目较多的植株细胞中,还观察到三价体和落后染色体的存在。结果表明低世代衍生系的减数分裂极度紊乱,在遗传上相当不稳定。5、SDS-PAGE检测发现:在高分子谷蛋白区域,PHW-SA表达出了一条华山新麦草和J-11都不具有的新带;在F2和BC1F1中,材料编号为135、147、150的植株也表达了此新带。而在低分子谷蛋白区域,PHW-SA和材料编号为138、139、141、144、145、148、149的植株表达了一条华山新麦草的条带。结果表明华山新麦草的染色体或是染色体片段已被导入部分F2和BC1F1植株。6、抗条锈病评估结果表明:在F2和BC1F1中,编号134的材料中感条锈病,编号138的材料高感条锈病,编号141的材料高抗条锈病,其余材料均中抗条锈病。7、SSR分子标记结果表明:13对SSR引物在华山新麦草中共扩增出106个片段,在J-11中共扩增出104个片段,在双二倍体PHW-SA中共扩增出91个片段。在普通小麦J-11的遗传背景下,双二倍体共获得42个多态性片段,占扩增总条数的46.15%。引物Xwmc619、Xwmc553、Xbarc127和Xgwm344分别稳定扩增出一条华山新麦草和PHW-SA具有、而J-11没有出现的条带,可作为鉴定华山新麦草Ns基因组的特异性标记。
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