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目的 皮肤衰老是一个漫长而复杂的演变过程,其主要表现为皮肤形态及功能上的改变。皮肤免疫系统功能失调不仅是皮肤衰老的结果,同时也是导致皮肤衰老的重要原因之一。中医理论体系中的卫气具有护卫肌表、温分肉、肥腠理、充肌肤、司开阖的功能。现代研究表明,卫气的这些功能及其分布、运行的节律与机体免疫系统及为相似,二者之间关系密切,且由于卫气与皮肤免疫系统中的郎格罕氏细胞在分布及功能上具有一致性,可见卫气与皮肤免疫系统具有相关性,故卫气与皮肤衰老间有着密切的联系。因此,本课题拟通过观察益气固表经典方剂玉屏风散对亚急性皮肤衰老模型小鼠皮肤免疫系统、抗氧化系统及胶原含量的影响,探讨卫气虚与皮肤衰老之间的联系,及补益卫气对延缓皮肤衰老的作用及相关机理。 方法 本实验中将2月龄的昆明种小鼠随机分为5组:正常组、模型组、维生素E-C合剂组、玉屏风散大剂量组、玉屏风散小剂量组。采用连续颈部皮下注射12.5%D-半乳糖(1000mg·kg-1),每日一次,连续六周,复制亚急性皮肤衰老小鼠模型。同时玉屏风散大剂量组予以玉屏风散水煎剂灌胃(18g·kg-1),玉屏风散小剂量组予以玉屏风散水煎剂灌胃(9g·kg-1),维生素E-C合剂组予以维生素E-C悬液灌胃(50mg·kg-1),其余各组给予等量生理盐水灌胃,每日一次。六周后,取小鼠背部皮肤,用透射电镜观察皮肤中郎格罕氏细胞超微结构的变化,并通过黄嘌呤氧化酶法测定皮肤中超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性,采用硫代巴比妥酸(Thibabituric Acid,TBA)法测定皮肤中丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)的含量,用碱水解法测定皮肤羟脯氨酸(Hydroxyproline,Hpy)的含量。 结果 1、玉屏风散能抑制皮肤郎格罕氏细胞超微结构的改变: 本实验中所复制的亚急性皮肤衰老模型小鼠郎格罕氏细胞形态结构较之正常小鼠发生了明显的变化。模型组郎格罕氏细胞细胞胞膜不完整,胞质内线粒体,肿胀、嵴变短、减少或消失,甚至形成空泡,内质网肿胀,空泡样变,内质网,Golgi复合体明显减少,Birbeck颗粒量少。而同时给予玉屏风散及维生素E-C合剂的各组的小鼠郎格罕氏细胞结构改变程度明显小于模型组,其胞膜完整,细胞核成分叶状,胞质内虽可见线粒体肿胀,脊排列稍乱,空泡样变,内质网肿胀,但程度较模型组明显减轻,且Birbeck颗粒量增加,内质网,Golgi复合体数量较模型组明显增多。 2 玉屏风散能提高皮肤SOD活性、减少皮肤MDA含量,增加皮肤羟脯氨酸的含量: 实验中D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠皮肤SOD活性降低,MDA含量升高,羟脯氨酸含量降低,与正常组相比具有非常显著性差异(P<0.01)。玉屏风散大、小剂量组及维生素E-C合剂组均能明显提高小鼠皮肤SOD活性,与模型组比有显