背景与目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,其发病率逐年上升且呈现年轻化趋势,严重危害女性健康。尽管目前乳腺癌分子分型（Luminal A型、Luminal B型、HER2阳性、三阴性乳腺癌等）已经展示出极高的临床应用价值,并给患者带来治疗获益,但相同类型的乳腺癌患者接受同种治疗时仍存在显著的疗效差异。因此,寻找新型分子标志物仍是一个重要的临床问题,对于解决乳腺癌的精准治疗具有深远的意义。人组织激肽释放酶（Kallikrein,KLK）基因家族,是一组编码丝氨酸蛋白酶的同源基因,亦是人类基因组中最大的蛋白酶基因簇,编码包含人组织激肽酶（KLK1、KLK1B）和14个激肽酶相关肽酶（KLK2-15）在内的15种丝氨酸蛋白酶。有研究表明,KLK4过表达可促进恶性口腔上皮细胞发生转移,亦可促进前列腺癌细胞发生上皮间质转化及恶性生长。此外,在前列腺癌及结肠癌中,KLK4高表达者的无复发生存时间较短,预后较差。在乳腺癌中,据报道,三阴性乳腺癌患者肿瘤组织内KLK4的表达水平明显高于周围正常组织,且基质细胞中KLK4的表达水平升高提示患者预后较差。然而,Xiao等人利用多种数学模型对大型临床病人数据库进行分析,发现Luminal型乳腺癌患者肿瘤组织中KLK4的表达水平与其复发转移风险呈负相关,提示KLK4在Luminal型乳腺癌发挥抑癌作用。因此,KLK4在乳腺癌中的具体作用及临床意义尚未明确,故本研究拟探索KLK4在不同分子分型乳腺癌中的表达差异及其与预后的相关性,明确KLK4对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭等能力的影响。方法:（1）通过美国癌症基因组图谱（the Cancer Gene Atlas,TCGA）数据库分析、Oncomine数据库分析及Kaplan-Meier生存分析研究KLK4在不同分子分型乳腺癌中的表达水平及其与预后的相关性;（2）收集140例乳腺癌患者原发肿瘤组织,通过免疫组化检测肿瘤细胞及间质细胞中KLK4的表达水平,并分析肿瘤细胞和间质细胞中KLK4的表达水平与患者预后的相关性;（3）利用si RNA敲减乳腺癌细胞MCF-7（KLK4高表达）中KLK4的表达,并通过细胞平板克隆实验、3D成球实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测KLK4对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果:（1）数据库分析发现:Luminal A型乳腺癌患者肿瘤组织中的表达水平显著高于其它分型乳腺癌且提示患者预后较好,同时分析多个乳腺癌数据库均发现KLK4在乳腺癌组织中高表达与更低的复发转移风险相关;（2）通过研究140例乳腺癌患者原发肿瘤组织中KLK4的表达水平发现:KLK4在肿瘤细胞及间质细胞中高表达均与更好的总生存和无复发生存相关,且在ER阳性/HER2阴性乳腺癌患者中这种差异尤为显著,进一步通过多因素COX回归分析证明肿瘤细胞中KLK4的表达水平是乳腺癌的独立预后预测因素;（3）在多种乳腺癌细胞系中对KLK4的m RNA水平及蛋白水平进行研究,得到与临床数据库分析相类似的结果:多种Luminal型乳腺癌细胞系高表达KLK4,其中MCF-7高表达尤为明显。此外,免疫荧光实验结果表明:KLK4蛋白主要在乳腺癌细胞胞浆中表达;（4）用si RNA敲减MCF-7细胞中KLK4蛋白表达后,细胞的迁移、侵袭及3D成球能力增强。结论:（1）Luminal A型乳腺癌患者肿瘤组织中KLK4的表达水平显著高于其它分子分型乳腺癌;（2）在乳腺癌（尤其是ER阳性/HER2阴性乳腺癌患者）中,肿瘤细胞和肿瘤基质细胞中KLK4高表达提示患者预后较好,且KLK4的表达水平可作为乳腺癌的独立预后预测因素;（3）在Luminal型乳腺癌细胞中,敲减KLK4能够促进细胞的迁移、侵袭及3D成球能力。