Hh信号通路抑制剂对肝内胆管癌RBE细胞生物学行为的影响研究

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目的:研究Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂环靶明(cyclopamine)对人肝内胆管癌细胞株RBE细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力的影响。方法:用台盼蓝染色计数法和MTT比色法检测环靶明对RBE细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率;Transwell检测环靶明处理前后RBE细胞侵袭能力的变化,Western blot检测环靶明处理前后Gli1、MMP-9在RBE中的蛋白表达及变化。结果:1.在一定范围内随着浓度的增高和作用时间的延长,环靶明对RBE细胞增殖的抑制作用越明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。2.环靶明可以明显促进RBE细胞的凋亡,且随着作用时间的增加,凋亡率也逐渐增加,不同浓度环靶明对RBE细胞凋亡的影响相互间差异有统计学意义(P<0.05)。3.环靶明处理的RBE细胞较未处理组侵袭能力明显减弱,两组相比差异有统计学意义(P<0.01)。4.肝内胆管癌细胞株RBE存在Gli1、MMP-9的蛋白高表达,环靶明处理后,Gli1、MMP-9的蛋白表达有下调趋势(P<0.05),且随着时间的增加表达降低。结论:1.阻断Hh信号通路能够抑制RBE细胞的增殖。2.阻断Hh信号通路能够促进RBE细胞的凋亡。3.阻断Hh信号通路能够抑制RBE细胞的侵袭能力。综上,Hh信号通路的异常激活可能与肝内胆管癌(ICC)的发生、发展、转移及预后密切相关。本研究提示特异性抑制Hh信号通路可能是治疗ICC的分子作用靶点。
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