脑胶质瘤(GBM)是中枢神经系统(CNS)最常见的原发性恶性肿瘤，目前GBM治疗存在的主要问题:①外科手术的精准定位;②药物的靶向治疗;③疗效及预后的准确评估。　　量子点(QDs)作为一种新型无机纳米荧光标记探针，具有荧光信号强、稳定性好等优点，能够实现生物多色成像。脂溶性QDs生物相容性差，体内不易排泄、易蓄积;水溶性QDs生物相容性较高，但其核壳结构易受环境因素影响，发生氧化破坏，产生细胞毒性，故限制了QDs在生物体内的应用。本课题组应用自主知识产权的脂质体包载水溶性QDs，旨在提高其物理学稳定性，并保留QDs荧光特性，降低生物学毒性。　　最新研究发现，L19及其衍生物可以特异性地与细胞外基质成分中的胞外纤维连接蛋白(FN)结合，实现GBM的靶向示踪和药物递送。基于已有文献，本研究选用CA（氨基酸短肽，L19抗体结合EDB-FN关键片段）作为靶向配基，将其修饰到药剂辅料PEG-DSPE上，制备包载水溶性QDs的新型脂质体，并加载多西紫杉醇(DTX)抗肿瘤药物[缩写:CA-(Q-D-lip)]，经大鼠尾静脉给药后，超声脑部定位，利用超声靶向微泡爆破技术(UTMD)可逆性开放BBB，递送QDs纳米粒突破BBB入脑，有效地将“量子点高效示踪技术”、“肿瘤靶向纳米粒制剂技术”和“UTMD开放BBB介导技术”三者有机结合，充分发挥新材料、新制剂和超声介导手段等技术优势，实现GBM特异性示踪及高效靶向治疗。　　MRI平扫及增强扫描能很好地显示肿瘤液化、坏死、出血及钙化等特征，肿瘤血供特点，强化特征，区分GBM组织、周围水肿区及正常组织。MRI灌注成像(PWI)常用来评价微循环分布特点，根据时间一信号强度曲线(TIC)反映脑组织及病灶的血液灌注变化。MRI扩散加权成像(DWI)是近年来发展起来的一种无创性功能成像技术，依据表观扩散系数(ADC)对水分子扩散能力大小进行量化分析，但ADC值还不能全面地阐述活体组织内的水分子扩散规律。体素内不相干运动(IVIM)是在DWI基础上的延伸扩展，避免了ADC单纯水分子扩散与灌注相关扩散混淆。单指数模型ADC与双指数模型IVIM的理论基础是水分子扩散符合正态分布，当b值较高时，水分子扩散呈非正态（高斯）分布。扩散峰度成像(DKI)指基于水分子呈非正态分布扩散模型的一种MRI技术，依此来评价水分子扩散的不均质性和受限程度。　　目前MRI及QDs荧光成像已成为肿瘤早期诊断和疗效监测的影像学检查方法之一，能从微观（水分子扩散、微循环灌注及异质性等）来综合反映GBM细胞构成及病理组织学分级，从宏观（肿体积变化、强化程度及方式、荧光示踪聚集数量及面积等）评价大鼠C6胶质瘤特异性示踪及靶向药物治疗效果。　　目的:　　结合MRI多序列检查、荧光示踪技术及病理组织学，探讨UTMD联合FN靶向肽CA修饰的Q-D-lip精准示踪和靶向治疗大鼠C6胶质瘤的可行性。　　方法:　　(1)FN主动靶向修饰的QDs-DTX-lip制备:选用FN为靶向位点，将FN靶向肽CA修饰到药剂辅料PEG-DSPE上，运用自主知识产权的脂质体包载水溶性QDs，并加载DTX，超声分散脂质体得到CA-(Q-D-lip);同法制备不含FN靶向肽CA或水溶性QDs脂质体。　　(2)制剂表征评价:检测CA-(Q-D)-l ip粒径大小及δ电位，荧光特征和QDs包封率;检测化疗药物DTX包封率以及脂质体稳定性;红外光谱仪证实CA是否成功修饰至脂质体上。　　(3)大鼠C6胶质瘤造模:①大鼠固定与切口选择;②大鼠钻孔;③大鼠C6胶质瘤细胞接种。　　(4)分组及给药治疗:采用雄性SD大鼠C6胶质瘤模型80只，设立对照组(Control组)及四个不同治疗组（QDs溶液结合超声Q-D+UTMD，空白脂质体结合超声Blank lip+UTMD;QDs脂质体结合超声Q-D-lip+UTMD，FN靶向肽修饰的QDs脂质体结合超声CA-(Q-D-l ip)+UTMD)，16只/组，定期分组给药，于第7、14、21及28天均行MRI常规、动态增强及多b值扩散加权序列扫描。　　(5)影像学检查及评价:1.计算增强MRI后GBM体积(V)，公式V=(W×L×H×π×4/3)×1/8;2.MRI动态增强扫描:采用Ax LAVA-xvDYN方案，层厚2mm，120圈/层块，Flip angle120，NEX=1，FOV80mm×80mm，Matrix160×160，采用4.5号儿科头皮针经鼠尾静脉手动推注钆喷替酸葡胺(Gd-DTPA)，4秒内完成，注射剂量0.4mmol/kg体重，造影剂注射完成后即行扫描，总共扫描时间为6分2秒。依据时间—信号强度曲线(TIC)特征，计算早期相对信号强化率(ARSER)，强化峰值时间(TTP);3.多b值扩散加权成像:采取OAx eDWI MB=7Head方案，第二次扫描定位像后，采取常规全脑自旋回波—回波平面成像(SE-EPI)序列，针对SD大鼠行全脑横断位扩散加权成像检查。扫描参数:TE minimum，TR2000ms，层厚3mm，层间距0mm，矩阵160×192，FOV80mm×100mm;扩散敏感因子(b)值分别采用0、30、100、200、400、1000、1500s/mm2，NEX=6次，扫描时间4分16秒。　　基于Matlab及C语言对图像进行后处理，通过Mitalytics软件获取b值—信号强度参数图和结果，采用不同数学扩散模型拟合图像，获得单指数模型ADC值，IVIM模型的D、D*及f值，DKI模型的Dappp及Kapp值;①ADC--单指数模型:ADC=ln(S0/S1)/(b1-b0)，b取值30、100、200、400及1000s/mm2;②IVIM双指数模型:Sb=S0[(1-f)×e(-bD)+f×e[-b(D+D*)]，f值为灌注分数，D值为真性扩散系数(ADC-slow)，D*值为假性扩散系数(ADC-fast)，b取值30、100、200、400及1000s/mm2;③DKI模型:Si/S0=exp{-bi×Dapp+bi2×Dapp2×Kapp/6}，Kapp为平均峰度，无单位;Dapp值指非高斯分布矫正过的ADC值，b取值30、100、200、400、1000、1500s/mm2。评价不同的数学扩散模型（ADC-单指数模型、IVIM-双指数模型及DKI模型）参数的评价效能，初步确定上述三种模型中最好及最稳定的扩散模型。　　(6)QDs荧光评价:　　应用小动物光学成像系统采集荧光图像，观察荧光聚集度、靶向肽脂质体的靶向性，测量荧光面积及肿瘤体积大小。　　(7)大体观察及生存期评价:同期另外选取40只健康成年雄性SD大鼠，随机分为5组观察，8只/组，按照以上方法进行造模，定期给药，本组实验仅用于治疗生存期评价，不参与影像学检查及病理组织学检测。　　(8)组织学及药物毒性评价:　　各组治疗后28天，完成MRI和荧光成像后，每组随机取出2只断头处死大鼠，取出脑组织和其他主要脏器器官。HE染色观察药物对大鼠主要脏器（心、肝、脾、肺、肾）的毒性作用、肿瘤组织病理变化，免疫组化观察肿瘤VEGF、CD31和Caspase-3表达程度。　　(9)统计学分析:　　统计学评价采用IBM SPSS19.0软件包;首先采用Kolmogorov-Smimov方法检验数据是否符合正态分布;若符合正态分布的计量资料，则采用x±SD表示;若不符合正态分布的数据，则采取中位数表示。标记误差线的柱状图、折线图等数据可视化部分以及组间差异的统计检验通过R语言实现。在同一及不同时间内，对照组与不同治疗组间C6胶质瘤体积变化、TIC信号强度差值、ARSER及TTP比较、多b值扩散加权成像中的多参数差异分析（包括单指数模型ADC值，IVIM模型的D、D*及f值，DKI模型的Dapp及Kapp值）采用两独立样本t检验。若方差齐性不能满足时，则采用Welch法近似t检验。显著性水平表达如下:*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。　　结果:　　①CA-(Q-D-l ip)成功制备，CA通过巯基键成功修饰至脂质体上。Q-D-lip颗粒大小及电位适中，包封率符合标准，QDs-lip荧光特性稳定;②各组ARSER＞60％。CA-(Q-D-l ip)+UTMD组治疗后体积缩小最明显，ARSER最小，效果优于其他四组;③CA-(Q-D-l ip)+UTMD组随时间增加，ADC、D值、Dapp值整体呈上升趋势，Kapp、D*及f值呈下降趋势;其余四组随时间增加，ADC、D值、Dapp值呈下降趋势，Kapp、D*及f值呈上升趋势;这些参数综合比较，ADC值相对稳定可靠，诊断效能较高;④CA-(Q-D-lip)+UTMD组QDs量分布最多（第7天），生存时间最长，在机体内有良好的生物安全性。各组VEGF及CD31表达比较:Control组＞B+lip+UTMD组＞Q-D+UTMD组＞Q-D-lip+UTMD组＞CA-(Q-D-l ip)+UTMD组，而Caspase-3呈反向表达。　　结论:　　本研究能有效地将CA-(Q-D-lip)+UTMD的“量子点高效示踪技术”、“肿瘤靶向纳米粒制剂技术”和“UTMD可逆性开放BBB介导技术”三者结合，充分发挥MRI多序列检查及QDs荧光成像的各自优势，协同互补，为肿瘤精准定位及有效治疗提供更全面及更准确的影像学信息。