轴突诱向因子Netrin-1蛋白在早期糖尿病视网膜病变中的表达

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目的:通过观察轴突诱向因子Netrin-1蛋白在STZ诱导糖尿病小鼠不同时期视网膜内表达水平,初步评价Netrin-1与早期糖尿病视网膜病变相关性。方法:选择健康、无眼疾的雄性C57BL/6小鼠60只,随机分为实验组45只(又分为糖尿病4w、8w、12w三组,每组15只),实验组小鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立STZ诱导的糖尿病小鼠模型;测定小鼠糖尿病不同时期的血糖及体重变化,采用视网膜石蜡切片HE染色观察小鼠糖尿病早期视网膜病理改变,以评价模型建立成功与否;采用免疫荧光染色方法检测Netrin-1蛋白在不同时期糖尿病小鼠视网膜中表达情况。结果:腹腔注射STZ后4W、8W、12W,糖尿病组血糖明显高于对照组,差异有统计学意义(p=0.000)。糖尿病组12w视网膜毛细血管壁稍厚,视网膜厚度增加,内界膜、内丛状层可见明显增厚,节细胞肿胀,排列紊乱,可见微血管瘤。免疫荧光染色可见正常组小鼠Netrin-1蛋白集中在视网膜神经节细胞层和内核层。WESTERN-BLOT检测未见Netrin-1目的蛋白表达。结论:STZ诱导的糖尿病小鼠适合早期糖尿病视网膜病变研究。糖尿病3个月即可出现较明显的病理改变,出现微血管瘤;Netrin-1在小鼠早期糖尿病视网膜病变中表达均高于正常组,与Netrin-1mRNA表达情况一致,但糖尿病组小鼠组间Netrin-1mRNA表达与Netrin-1蛋白表达情况不一致,Netrin-1在基因及蛋白不同层面的表达可能具有一定差异;Netrin-1可能参与早期糖尿病视网膜病变的发生,此假设还有待进一步证实;Netrin-1在血管生成和神经导向调节的中的作用研究,为很多相关疾病诸如缺血性疾病、新生血管性疾病等的发病机制和临床治疗提供了新的希望。
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