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灵芝作为一种名贵的食药两用真菌,在东方国家已经有2000多年的使用历史,本实验室从黑灵芝中分离纯化出一种黑灵芝多糖PSG-1,前期深入研究了PSG-1的抗肿瘤、抗氧化、以及抗心血管疾病等功能,本研究使用环磷酰胺诱导免疫抑制小鼠模型,基于自噬通路探讨黑灵芝多糖对环磷酰胺诱导的小鼠肠道屏障损伤的保护作用,又使用丙烯醛建立了巨噬细胞损伤模型,基于氧化应激、细胞凋亡和细胞自噬的角度探讨黑灵芝多糖对巨噬细胞的保护作用,现将本研究的主要结论归纳如下:1、环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠中正常自噬水平会受到抑制,小肠组织的紧密连接蛋白zo-1、claudin-1、occludin的表达水平也会降低,从而破坏肠粘膜完整性,造成肠道免疫功能障碍;黑灵芝多糖可以恢复小鼠的正常自噬水平,提高小肠组织的紧密连接蛋白表达水平,从而在一定程度上修复小鼠肠粘膜屏障。2、丙烯醛诱导的巨噬细胞损伤模型会造成细胞活力下降,细胞的SOD活力和CAT活力受到抑制,MDA的产量升高,提高Nrf2/Keap1通路关键蛋白Keap1的表达,降低Nrf2的表达,从而使巨噬细胞内的氧化/抗氧化平衡受到破坏;黑灵芝多糖可以在一定程度恢复细胞活力,提高SOD以及CAT的活力,降低MDA的含量,降低Keap1的表达,提高Nrf2的表达,从而保护细胞免受氧化应激损伤。3、丙烯醛诱导的巨噬细胞损伤模型中ROS的含量增高,线粒体的跨膜电位被破坏,MMP降低,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平降低,CytC、caspase-3和caspase-9等凋亡正相关蛋白的表达量上升,从而诱导巨噬细胞发生线粒体途径的细胞凋亡;黑灵芝多糖处理可以降低丙烯醛作用下的巨噬细胞中的ROS含量,提高MMP,降低CytC的蛋白表达水平和caspase-3和caspase-9的相对表达量,提高Bcl-2的表达水平,阻止巨噬细胞发生线粒体途径的凋亡。4、丙烯醛处理巨噬细胞可以降低m-TOR通路关键蛋白p-m-TOR的表达水平,提高自噬关键蛋白LC3、Beclin-1、Atg5、Atg7的表达水平,从而导致巨噬细胞的过度自噬;PSG-1处理细胞则可以提高p-m-TOR表达水平,降低自噬关键蛋白的表达水平,从而保护细胞免受细胞过度自噬的损伤,自噬抑制剂作用于细胞,可以抑制凋亡通路关键蛋白CytC的表达水平,说明黑灵芝多糖可能通过自噬依赖性的凋亡途径对ACR作用下的巨噬细胞进行保护。