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目的:
通过行为学测试观察氢气(H2)对慢性低氧(02)高二氧化碳(C02)模型大鼠学习记忆的保护作用并探讨其可能机制。
方法:
选取34只SPF级雄性SD大鼠进行八臂迷宫训练,按一定标准淘汰10只,将八臂迷宫训练达标的24只大鼠随机分为常氧对照组(NC)、低02高C02+生理盐水组(MS)、低02高C0+氢气组(MH),每组8只。NC组于常温常压条件下饲养,MS组和MH组置于02浓度9%~11%和C02浓度5%~6%的舱内饲养,每天8h,每周6d,持续4周,其余时间饲养条件与NC组相同。每天出舱后,MS组大鼠腹腔注射生理盐水,MH组大鼠腹腔注射饱和氢气水,剂量均为5ml/kg,据体重调整注射剂量。4周后,八臂迷宫测试三组大鼠的学习记忆能力,记录工作记忆错误次数(WME)、参考记忆错误次数(RME)、总记忆错误次数(TME);酶联免疫吸附法检测大鼠海马8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)含量;分光光度计检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;尼氏染色光镜下观察三组大鼠皮层及海马神经元尼氏体形态及数目变化,荧光染色观察三组大鼠皮层及海马组织凋亡小体数目,电镜下观察三组大鼠海马神经元、神经胶质细胞、髓鞘、突触小泡超微结构。
结果:
(1)与NC组比较,MS组和MH组即两模型组工作记忆错误(WME)次数、参考记忆错误次数(RME)、总记忆错误次数(TME)均增加,WME增多较显著;海马8-OHdG、血清MDA含量增加,血清SOD活性降低(P<0.05),海马部位细胞结构排列紊乱,尼氏体数目改变,形状欠规整,MS组和MH组凋亡小体数量较NC组有不同程度增多,电镜观察海马神经元、胶质细胞等组织结构有不同程度水肿、凋亡、崩解。(2)与MS组相比,MH组大鼠WME、RME、TE次数均有减少,海马8-OHdG、血清MDA含量降低,血清SOD活性增加(P<0.05),海马及额叶皮质组织细胞结构较整齐,尼氏体较为丰富完整,凋亡神经元数目明显减少;海马超微结构神经元、胶质细胞髓鞘及突触小泡损伤明显降低。
结论:
氢气改善低02高C02模型大鼠学习记忆障碍,可能与减少神经元凋亡和抑制氧化应激损伤有关。