幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，简称Hp)感染了世界上一半以上的人口。已证实Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡的重要病因，与胃癌和胃MALT淋巴瘤的发病也有密切关系。现有根除Hp的手段主要是联合应用抗生素，但由于该菌感染的普遍性、耐药菌株的不断增加、较高的花费以及病人的低依从性等，限制了抗菌药物的疗效，进行免疫防治研究十分迫切。有研究表明尿素酶B亚单位(UreB)可以刺激机体产生免疫应答且具有较好的免疫保护性。本研究克隆幽门螺旋杆菌UreB基因，通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化烟草、水稻和草莓，获得以下结果： 1．利用PCR技术从浙江临床幽门螺旋杆菌菌株总DNA中扩增出UreB结构基因，通过定向克隆的方法插入克隆载体pGEM-7zf(+)中。对重组质粒进行基因序列测定，并通过Genedoc 3.2软件进行序列分析和比较。在此基础上构建重组表达载体pBI-UreB和pCA-UreB，将UreB基因置于CaMV 35S启动子控制之下。 2．以烟草叶盘为材料，通过根癌农杆菌EHA105的介导，将pBI-UreB质粒导入烟草叶片组织中，通过两轮抗性筛选，得到抗卡那霉素(Kan)的再生植株。对所得24株再生苗进行PCR检测，表明阳性苗比例为66％。PCR-Southern结果进一步证明目的基因确已整合到烟草基因组中。Western-blot结果显示UreB蛋白已经在部分烟草中得到表达。 3．以水稻成熟胚诱导的愈伤组织为材料，通过根癌农杆菌EHA105的介导，将pCA-UreB质粒导入水稻愈伤组织中，通过两轮抗性筛选，得到抗潮霉素(Hym)、GUS反应阳性的再生植株。对所得12株再生苗进行PCR检测，表明阳性苗比例为75％。PCR-Southern结果进一步证明目的基因确已整合到水稻基因组中。Western-blot结果同样显示UreB蛋白已经在部分水稻中得到表达。并尝试通过农杆菌法，把UreB基因转化到草莓中，此实验仍在进行中。