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丙型肝炎病毒(HCV)隶属黄病毒科,其毒粒仅包含单一的9.6kb正链基因组RNA作为遗传信息的载体和病毒早期开始翻译的模板,外层由Core蛋白组成的核衣壳和结合了E1、E2糖蛋白的包膜组成。HCV从二十世纪开始传播至今,已在全世界范围内感染大约1.7亿人口,成为人类健康的严重威胁,对社会造成了巨大的卫生和经济损失。HCV在肝脏内造成感染的细胞仅占很小比例,但由它逃逸宿主免疫形成慢性感染和宿主的持续性炎症应答,将会造成长期的肝脏损伤,是导致病情发展为脂肪肝、肝硬化和肝细胞癌的主要诱因。HCV感染在肝脏内调节多种脂肪代谢基因,诱发的肝细胞质大量积累脂滴,也是推动病程发展,削弱干扰素联合治疗效果的重要原因。病毒在肝细胞内复制的过程中通过自身表达非结构蛋白诱导和组建其复制复合物的产生,这个过程中也需要招募众多宿主蛋白行使功能。本研究的初衷即寻找人肝组织中表达,但是参与到HCV复制过程中的宿主蛋白,研究其中原理和抑制病毒复制的新方向。首先我们通过酵母双杂交实验筛选出若干可能与HCV蛋白相互作用的宿主因子,从中选取了与病毒基因组复制必须的——以RNA为模板的RNA多聚酶,即HCV NS5B相互作用的细胞色素P450家族4亚族F多肽12(CYP4F12)作为继续研究的靶标。经过CoIP,荧光共聚焦和分离HCV CRC实验,我们确定了CYP4F12蛋白通过NS5B中段的手掌部结构实现相互作用。在活细胞内模拟NS5B结合病毒负链RNA上逆向5’-UTR合成基因组RNA的过程,发现CYP4F12能够提高NS5B的聚合酶活性。并且在HCV复制子系统和JFH-1活病毒感染体系中,我们观察到外源表达CYP4F12对病毒RNA水平的蛋白水平的增强作用,敲减内源CYP4F12则会降低HCV复制水平。由于没有CYP4F12启动子结构和调控的具体研究报道,我们经过筛选构建了它的启动子报告质粒,并通过一系列的实验分析确定了上面的p50和SREBP1结合位点的具体位置,以及两者之间不存在协同激活,反而在相互竞争结合空间的关系。并以这些结果为基础,研究发现了：HCV在感染细胞过程中上调p50和SREBP1水平；HCV NS3/4A特异的增强CYP4F12启动子上SRE和SREBP1的结合,而p7蛋白则对p50结合有一定促进。从而揭示HCV感染中对CYP4F12的诱导调控方式。同时,初步探索了HCV对CYP4F亚族其他成员的影响,发现CYP4F11受到和CYP4F12类似的调节,并且幅度更大。本实验首次将细胞色素酶P450和HCV联系在一起,为进一步理解HCV在细胞内复制的过程提供了新的信息,并指出了HCV影响细胞脂类代谢的另一个途径。