含红芪/黄芪补中益气汤对SAMP8鼠脾淋巴细胞免疫功能影响的研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:wang605631496
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目的:以含红芪和含黄芪的补中益气汤及等体积生理盐水分别灌胃青龄小鼠后制备含药血清,将含药血清与SAMP8小鼠脾脏淋巴细胞共培养,比较含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清对SAMP8小鼠脾脏淋巴细胞抗免疫衰老作用并探讨相关机制。方法:取清洁级昆明种青龄小鼠90只,雌雄各半,随机分为3组,每组30只,分别以含红芪的补中益气汤,含黄芪的补中益气汤每日4g·Kg-1剂量以及等体积的生理盐水灌胃,每日1次,连续灌胃14次,末次灌胃两小时后眼球摘除取血,制备含药血清。通过MTT比色法检测各组含药血清刺激SAMP8鼠脾淋巴细胞后的增殖能力,确定最佳作用浓度及培养时间。补中益气红芪组、补中益气黄芪组及空白血清组分别按照最佳含药血清培养浓度和时间与SAMP8小鼠脾脏淋巴细胞共培养,青龄鼠组和SAMP8组以含10%胎牛血清的完全培养液分别与青龄小鼠脾淋巴细胞及SAMP8小鼠脾淋巴细胞共培养。检测各组淋巴细胞在ConA诱导下的体外增殖能力,流式细胞术检测各组T淋巴细胞亚群分化的影响,ELISA法测定细胞培养上清液中IL-2和IFN-γ的含量,实时荧光定量PCR检测各组淋巴细胞内CD28分子mRNA的表达量,Western-Blot检测各组淋巴细胞内CD28蛋白含量。结果:当含药血清浓度为40%,作用时间为48h时,含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清均能提高SAMP8鼠T淋巴细胞的增殖能力;含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清对SAMP8小鼠T淋巴细胞亚群的分化作用不明显,没有统计学差异;均可促进培养上清液中IL-2和INF-γ的分泌,且分泌IL-2水平方面,补中益气红芪组优于补中益气黄芪组(P<0.05);均能增加T淋巴细胞中CD28分子mRNA的表达量,且补中益气红芪组优于黄芪组(P<0.05);均能提高SAMP8鼠脾脏CD28蛋白的表达,补中益气红芪组与补中益气黄芪组无明显差异。结论:含红芪和含黄芪的补中益气汤含药血清均能改善免疫状态,且在提高增殖能力、促进IL-2分泌及提高CD28分子mRNA的表达量方面补中益气红芪组优于补中益气黄芪组。
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