长春碱高效提取纯化的工艺研究

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长春花是夹竹桃科长春花属植物,在我国广为种植。长春花中含有大量的生物碱,其中长春碱具有广谱抗肿瘤活性,能治疗多种癌症。本文建立了长春碱的RP-HPLC分析方法和样品制备方法,研究了从鲜长春花中高效提取、纯化长春碱的方法,确定了全新的生产工艺,并进行了中试放大实验。主要结论如下: 1.确立了长春花中长春碱、长春新碱、长春质碱和文多灵等四种生物碱的检测方法:色谱柱:DiamonsilTMC18ODS (250×4.6mm i.d.,5μm);流动相;甲醇:乙腈=4:1(溶液A);水:二乙胺=986:14,用磷酸调节pH=7.2(溶液B);380ml A和620ml B混合作为流动相;流速:2ml/min;进样量:10μl;柱温:23℃;检测波长:220nm。 2.确定了长春碱提取、纯化的工艺路线,其工艺流程如下: 具体工艺参数如下: (1)鲜磨匀浆提取工艺条件为:萃取溶剂为75%乙醇溶液,料液比为1:3,匀浆时间为6min。负压空化强化提取工艺条件为:提取溶剂为75%的乙醇溶液,料液比1:5,萃取时间25min,通气量为2m3/h。萃取工艺中长春碱的提取率为97.3%,经萃取、浓缩后得到纯度为10%的长春碱粗提粉。 (2)长春碱纯化工艺条件为:长春花粗提粉:水:沸腾乙醇=100:200:4000,经结晶后,得到纯度为40%的长春碱粗品。取纯度为40%的长春碱,硅胶为300-500目,上样量3g,洗脱剂:氯仿:甲醇=100:2,洗脱液流速:3BV/h。此工艺条件下收集到纯度在95%以上的组分1.13g。将纯度为95%以上的硫酸长春碱在60℃下溶解于90%的乙醇溶液中,冷却至0℃,得到硫酸长春碱晶体,纯度为98.2%。 利用这一工艺提取长春碱,长春碱最终得率为十万分之六,产品纯度可达98.2%。在此基础上制定了长春碱的质量标准,并进行了年产9kg硫酸长春碱的可行性研究。
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