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目的：以H2O2损伤的LO2细胞为模型,研究明确胡黄连苷Ⅱ的肝细胞保护效应,及Keapl-Nrf2-ARE信号通路在其中的调控作用机制。方法：1、胡黄连苷Ⅱ对H2O2损伤的LO2细胞保护效应研究LO2细胞先予不同浓度胡黄连苷Ⅱ处理3h后,除空白对照组外,建立H2O2(终浓度0.6mM,1h)损伤的LO2氧化损伤模型,测定细胞活力、ROS清除能力、细胞培养上清中LDH含量水平、线粒体膜电位(MMP)以及MDA生成水平,以分析胡黄连苷Ⅱ的肝细胞保护效应。2、胡黄连苷Ⅱ对H2O2诱导的氧化损伤LO2细胞二相解毒酶mRNA表达影响LO2细胞先予不同浓度胡黄连苷Ⅱ药物处理3h后,除空白对照组外,加入H2O2(终浓度0.6mM,1h)诱导LO2肝细胞氧化损伤,用Real-time RT-PCR分析胡黄连苷Ⅱ对GST, NQ01, Gclc, Gclm的mRNA水平的影响。3、胡黄连苷Ⅱ对H2O2诱导LO2细胞氧化损伤Keapl-Nrf2-ARE通路信号蛋白表达影响LO2细胞先予不同浓度胡黄连苷Ⅱ药物处理3h后,除空白对照组外,加入H2O2(终浓度0.6mM,1h)诱导LO2肝细胞氧化损伤,后分别于1h、24h和48h不同时间点,用Real-time RT-PCR和Western Blotting分析胡黄连苷对Keapl, Nrf2和HO-1mRNA水平和蛋白水平表达的影响。结果：1、采用H2O2诱导LO2肝细胞损伤后,与空白对照组比较,模型组细胞存活率显著下降,经胡黄连苷Ⅱ预处理能明显减弱H2O2导致的LO2细胞活力下降、细胞上清液中LDH的增高、以及升高的ROS、MMP和MDA水平,并呈现一定程度的剂量依赖性。2、与正常对照组比较,模型组GST, NQ01, Gc1c, Gc1m的mRNA水平明显降低,而胡黄连苷Ⅱ预处理能明显诱导该二相解毒酶mRNA水平表达上调,且作用呈一定程度剂量依赖性。3、在胡黄连苷Ⅱ预处理3h及H2O2损伤后1h,HO-1的mRNA和蛋白水平均显著增高,而Nrf2和Keap1的mRNA和蛋白水平均无明显变化；继续培养至24h,高浓度胡黄连苷Ⅱ预处理组及模型组HO-1的mRNA和蛋白表达均较空白组明显增高,而高浓度胡黄连苷HNrf2的mRNA和蛋白水平明显升高,各条件处理对Keap1的mRNA和蛋白表达无调节作用；至48h,高浓度胡黄连苷Ⅱ预处理组HO-1蛋白水平较空白组和模型组仍有增高趋势,高浓度PicⅡ预处理组Nrf2的mRNA和蛋白水平均较模型组增高,但各处理组Nrf2的mRNA和蛋白表达水平均较空白对照组明显降低,胡黄连苷Ⅱ对Keap1的mRNA表达有上调趋势,但蛋白水平呈下调作用。结论：1、胡黄连苷Ⅱ对H2O2诱导的氧化损伤LO2细胞有保护作用,该细胞保护效应与清除ROS的直接抗氧化作用有关；2、胡黄连苷Ⅱ通过上调氧化损伤细胞二相解毒酶基因表达,增强细胞自身抗氧化能力,发挥细胞保护作用；3、胡黄连苷Ⅱ通过诱导Nrf2的mRNA和蛋白水平表达增高,同时在翻译后水平增加Keap1降解,进而上调抗氧化作用元件ARE下游抗氧化酶HO-1的表达发挥抗氧化作用,激活Keapl-Nrf2(ARE)-HO-1信号通路是胡黄连苷Ⅱ发挥肝细胞保护效应的重要机制之一。