【摘 要】
：
别构配体由于作用位点远离正构配体与靶点蛋白的结合区域,能通过别构效应远程调控靶点蛋白介导的药理学作用,具有毒副作用小和药效活性强的特点,已发展成为受体靶向药物研究领域的重要研究内容。作者所在实验室在前期工作中,建立了基于β2-肾上腺素受体（β2-AR）色谱方法,证明其能用于中药中受体靶向活性成分筛选。然而,从活性成分的药效特征角度分析,β2-AR色谱依然无法区别目标成分受体激动/拮抗活性,难以解决
论文部分内容阅读
别构配体由于作用位点远离正构配体与靶点蛋白的结合区域,能通过别构效应远程调控靶点蛋白介导的药理学作用,具有毒副作用小和药效活性强的特点,已发展成为受体靶向药物研究领域的重要研究内容。作者所在实验室在前期工作中,建立了基于β2-肾上腺素受体（β2-AR）色谱方法,证明其能用于中药中受体靶向活性成分筛选。然而,从活性成分的药效特征角度分析,β2-AR色谱依然无法区别目标成分受体激动/拮抗活性,难以解决别构配体筛选的问题。据此,本论文聚焦别构配体的药物研究前沿,开展别构响应型β2-AR色谱方法研究,并将其应用于清半夏受体靶向成分筛选及药效特征分析,有望为其他中药别构配体的筛选提供方法学借鉴。论文共分为四章,主要内容如下:1.建立了基于双重作用力的固定化β2-AR色谱新方法。大肠杆菌重组制备组氨酸（His）标签β2-AR,通过His-NTA-Ni2+的螯合作用和受体-阿普洛尔（β2-AR非选择性拮抗剂）亲和作用,将β2-AR固定至大孔硅胶表面,制备β2-AR色谱固定相。扫描电子显微镜、X射线光电子能谱和免疫透射电子显微镜对固定化受体形貌、元素组成和抗体识别活性进行表征。通过沙丁胺醇和普萘洛尔等工具药的保留时间对固定化β2-AR色谱柱配体识别活性和特异性进行表征。结果表明,β2-AR在硅胶表面形成了单分子层。证明固定化β2-AR色谱柱具有特异性识别其激动剂和别构配体的活性,能为复杂样品中β2-AR激动剂和别构配体的筛选提供方法。2.基于药物-受体相互作用,建立了β2-AR别构配体色谱鉴别方法。采用吸附能量分布模型和前沿分析法研究了沙丁胺醇、特布他林和妥布特罗三种激动剂与固定化β2-AR的相互作用。采用竞争置换法、直接进样法和非线性色谱法研究了别构配体Cmpd-15对激动剂与固定化β2-AR相互作用的影响及规律。结果表明,三种工具药与固定化β2-AR的相互作用符合单朗格缪尔吸附模型,存在一类结合位点,其结合常数分别为（9.11±0.20）×10~4 M-1、（1.87±0.19）×10~4 M-1和（1.46±0.24）×10~5 M-1,别构配体Cmpd-15能显著降低激动剂与固定化受体的结合常数。证明固定化β2-AR色谱能根据相互作用参数变化规律鉴别受体的别构配体,并对其别构效应进行定量评价。3.清半夏β2-AR靶向成分筛选。以止咳平喘类中药清半夏为例,采用固定化β2-AR色谱法对其提取液进行了分析,高效液相色谱对保留成分进行鉴定,直接进样法研究活性成分与固定化β2-AR之间的相互作用。结果表明,盐酸麻黄碱为清半夏中特异性作用于β2-AR的靶向成分,其结合常数为1.70×10~5 M-1;清半夏中不存在作用于β2-AR的别构配体。证明清半夏主要通过激动性活性成分盐酸麻黄碱发挥止咳平喘作用,为其他中药活性成分筛选及药效鉴别提供了借鉴。
其他文献
为了解海南东方市近岸海域波浪基本特征,根据东方海洋环境监测站使用的SZF型波浪浮标连续11 a的实测数据,进行了统计分析。首先对波浪要素进行统计,得到了各向各级波高的季节分布,以及波高和周期的均值与极值；再对波高和周期的联合分布、平均持续时间与波高的关系进行了探讨；最后选取一典型台风浪过程进行分析。结果表明本海域以S向浪出现频率最高,为14.3%,其次是N向和NNE向,频率均为11.9%；强浪向为
目的：观察高尤-13对慢性不可预知温和应激（CUMS）大鼠血清P物质（substance P,SP）、血管活性肠肽（vasoactive intestinal peptide,VIP）和抑郁行为的影响。方法：将48只雄性SD大鼠按体重随机分为正常组、模型组、氟西汀组、高尤-13低、中、高剂量组，采用慢性不可预知温和应激与孤养结合的方法制备抑郁模型大鼠，正常组、模型组灌胃蒸馏水，氟西汀组按3.3 m
＜正＞铁道游击队主题歌《弹起我心爱的土琵琶》：“西边的大阳就要落山了，微山湖上静悄悄，弹起我心爱的土琵琶，唱起那动人的歌谣……”这首动听的歌曲，唱遍了全中国，影响着几代人，至今仍在中国大地上，以昂扬的气势广为传唱。铁道游击队影视剧中，《弹起我心爱的土琵琶》歌唱者青年英雄小坡，在艰难的抗战时期，不畏艰险，英勇杀敌的动人故事，更是感动着每一个有血气的中国人。“小坡”是著名作家刘知侠依据微山湖区战斗英雄
介绍了国内外封堵机理及油基钻井液防漏堵漏技术与应用现状。封堵机理主要划分为刚性封堵理论、柔性封堵理论及提高地层承压能力理论；堵漏技术主要包括随钻防漏堵漏技术、承压堵漏技术及聚合物凝胶堵漏技术，分析了各类封堵理论与防漏堵漏技术不足，讨论了当前油基钻井液防漏堵漏发展所面临的技术问题，指出了油基钻井液防漏堵漏理论与技术发展方向。
竹子生长过程中吸收的二氧化碳会转移存储在竹产品中，并在产品碳足迹中以负的二氧化碳排放当量形式被扣除。目前竹产品全生命周期碳足迹研究甚少，多集中在竹林培育经营阶段的碳固定，忽略了竹产品的碳转移和碳存储。文中简要介绍了基于生命周期评估系统（LCA）的碳汇计量标准，分析了主要工程竹产品的碳足迹研究结果，发现：1)LCA碳足迹评价标准中，以ISO14067和PAS2050应用最广，在目的和范围、抵消、数据
为分析丝绸产品原料的碳足迹，对坯绸与丝绵产品生产过程的碳足迹进行核算与评价。结果表明：以鲜茧和干茧为原料生产的坯绸产品碳足迹分别为24.93 kgCO2e/kg和27.84 kgCO2e/kg，其中缫丝工序的碳足迹最大，分别约占两种坯绸产品碳足迹的47.39%和42.45%；丝绵产品从蚕茧入库到生产完成的碳足迹为10.14 kgCO2e/kg，其中煮绵脱胶工序的碳足迹最大，约占丝绵产品碳足迹的39
高校是国家人才培养的重要基地,高校实验室是高等教育的重要组成部分。随着社会的发展与进步,高校实验室向开放性实验室转变的需求愈发明显。因此,本文将对高校开放性实验室对生产及科研的意义进行剖析,同时重点探讨高校实验室与科研生产结合的有效方式。
＜正＞宝政办发〔2022〕44号各县、区人民政府，市政府各工作部门、各直属机构：《宝鸡市进一步强化稳就业促进高质量充分就业12条政策措施》已经市政府同意，现予以印发，请结合实际，认真抓好贯彻落实。2022年6月15日宝鸡市进一步强化稳就业促进高质量充分就业12条政策措施
人工智能对就业的影响是个多维度复杂的课题，目前学术界尚未形成统一的认识。国内外学者虽在某些领域取得了一定的成果，如人工智能促进新型教育模式发展、就业市场发展，以及辅助人力资源管理等，但是相关研究仍存在不足。文章在总结归纳了人工智能对就业影响的研究现状和作用机制的基础上，指出了研究的不足和面临的问题，给出了解决问题的对策和建议。研究成果可在促进人工智能和产业结构、就业协调发展等相关问题的解决上提供借