在基因手段的肿瘤治疗中,由于裸siRNA难以递送进入细胞而影响了此类干扰技术的效用。本研究制备了新型的纳米级的siRNA载体,可以有效包载及转染siRNA,使siRNA进入细胞并发挥肿瘤抑制作用。体内外实验表明,新制备的载体可以有效的将siRNA递送进入肿瘤细胞,表达出抗肿瘤活性。在本研究中,我们做了以下研究:1.本论文设计并以液相接肽方法制备了一种全新的化合物1-CH₃-β-Carboline-3-Arg-Gly-Asp-Ser。通过测定化合物的核磁、质谱、红外光谱、紫外光谱、HPLC来表征其性质及结构。2.用薄膜分散法及正交试验筛选最优处方制备得到1-CH3-β-Carboline-3-Arg-Gly-Asp-Ser自组装载体（简称为CRS）,通过基因压缩法制备载VEGF-siRNA的CRS:VEGF-siRNA/CRS。通过电泳实验验证了载药的成功;通过体外释放研究了复合物的释放行为;透射和扫描电镜下观察到该制剂外观呈类球形;激光纳米粒度仪测定其粒径在100-200nm左右;激光照射观察到丁达尔效应。3.体外细胞实验选取了人宫颈癌HeLa细胞株,激光共聚焦显微镜观察siRNA的转染效果;Cell Counting Kit-8（CCK-8）法测定不同浓度VEGF-siRNA/CRS的细胞毒作用,并与CRS、VEGF-siRNA、DEPC水及市售转染试剂进行了比较。4.蛋白水平的基因沉默效率研究中选取了人宫颈癌HeLa细胞株,通过ELISA测定分泌VEGF蛋白的含量,结果表明:VEGF-siRNA/CRS表现出基因沉默效应。5.mRNA水平的基因沉默效率研究,选取宫颈癌HeLa细胞株,通过RT-PCR测定细胞内产生的mRNA的含量,结果表明:VEGF-siRNA/CRS可以明显降低VEGF mRNA表达。6.体内动物实验:选取S180荷肉瘤小鼠,小动物荧光实验追踪载体体内靶向分布;急性毒性实验验证膜材大剂量低毒性;并通过肿瘤抑制试验观察给药5天后,给药组肿瘤大小明显小于对照组。以上结果表明,VEGF-siRNA/CRS在小鼠肿瘤组织的分布最多,具有明显的肿瘤抑制作用。结论:本课题制备了一种全新的siRNA递送系统VEGF-siRNA/CRS,具有抗肿瘤效果,具有较高的基因沉默效率。