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第一部分:蛇床子素、黄芩苷对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响
目的:探讨蛇床子素、黄芩苷对体外培养人黑素细胞及其与角质形成细胞共培养体系中对酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。
方法:培养人表皮黑素细胞及建立黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,利用四唑盐(MTT)比色法、多巴氧化法及NaOH法测定蛇床子素、黄芩苷对黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响。以补骨脂素作为阳性对照。
结果:
1、蛇床子素、黄芩苷对酪氨酸酶的激活作用与阴性对照组相比,差异有显著性;对共培养体系中黑素细胞酪氨酸酶的激活作用强于对单纯黑素细胞的作用；组间比较显示,黄芩苷对酪氨酸酶的激活作用强于蛇床子素;蛇床子素与补骨脂素间差异无显著性。
2、蛇床子素、黄芩苷对黑素细胞单培养及共培养体系中黑素含量的影响与阴性对照组相比,它们可明显提高两体系中黑素的含量,且对共培养体系中细胞黑素含量的促进作用强于对单纯黑素细胞的作用；两两比较显示,蛇床子素、黄芩苷的作用均强于补骨脂素。
结论:蛇床子素、黄芩苷对人黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成均有较强的促进作用,且对共培养体系的作用强于对单纯黑素细胞的作用。
第二部分:蛇床子素、黄芩苷对黑素细胞树突形成调控基因Rac mRNA和Rho mRNA表达的影响
目的:探讨蛇床子素、黄芩苷对体外培养人黑素细胞与角质形成细胞共培养体系中树突形成调控基因Rac mRNA和Rho mRNA表达的影响。
方法:建立人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养体系,采用RT-PCR方法检测蛇床子素、黄芩苷处理细胞12～24 h后,对Rac mRNA和Rho mRNA表达的影响。
结果:
1、蛇床子素处理细胞共培养体系12～24 h后,Rac mRNA表达量较阴性对照组明显增加,而Rho mRNA表达量较阴性对照组差异无显著性。
2、黄芩苷处理细胞12～24 h后,Rac和Rho mRNA的表达量较阴性对照组相比差异无显著性。
结论:
1、蛇床子素可通过上调Rac mRNA的表达,促进树突形成,促进黑素转运。
2、黄芩苷对Rac mRNA和Rho mRNA无明显作用,对黑素细胞树突形成无影响。