朝药北葶苈子抗炎活性成分及其脂溶性成分的研究

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北葶苈子为十字花科植物独行菜Lepidium apetalum Willd.的干燥成熟种子,具有抗菌、抗癌、调节血脂等药理作用。为了进一步深入研究开发应用该药,本实验将针对北葶苈子的化学成分及其抗炎活性做主要研究,以充分发挥北葶苈子的药用价值并提供科学依据。本实验选择70%乙醇对北葶苈子进行加热回流提取,用石油醚对浓缩旋干得到的浸膏进行脱脂后用乙酸乙酯萃取,得到乙酸乙酯层。利用Sephadex LH-20柱层析法、硅胶柱层析法和制备型中压液相等不同色谱手段对乙酸乙酯层进行分离纯化。利用多种波谱学方法,结合参考文献鉴定出了 10种化合物。化合物分别为:β-谷甾醇(1),胡萝卜苷(2),异鼠李素(3),异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(4),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(5),芥子酸(6),1(E),2(E)-O-二-芥子酰基-β-D-葡萄糖苷(7),1-棕榈酸单甘油酯(8),1-硬脂酸甘油酯(9),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(10)。利用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7作为炎症模型,对所得化合物进行体外抗炎活性测定。化合物7、8在20 μM和40 μM浓度下可显著降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放出NO的含量,具有较强的抗炎活性。化合物3、5、8、9是首次从北葶苈子中分离得到,化合物8、9是首次从独行菜属中分离得到,化合物9是首次从十字花科中分离得到。目前药典中并未收录有关北葶苈子含量标准的数据,而在对北葶苈子进行提取分离的过程中发现化合物4为其主要成分,所以利用HPLC对其进行含量测定实验,为药典中北葶苈子的含量标准提供参考。在10.0-500.0 μg/mL浓度范围内,异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷的线性关系良好为Y=8088.8X+35308(R2=0.9991),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2%(n=6),加样回收率为100%(RSD=1.23%),由此说明,HPLC法能够准确地测定北葶苈子中异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量。结果显示,异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷在北葶苈子中的含量为7.5mg/g。葶苈子有南北之分,因为产地不同,十字花科植物播娘蒿Descurainia sophia(L.)Webb.ex Prantl.的种子称为南葶苈子,主要分布于江苏、安徽、浙江等地;十字花科植物独行菜Lepidiumapetalum Willd.的种子称为北葶苈子,主要分布于吉林、辽宁、内蒙古、河北等地。因为二者药理作用不同,可能与成分组成和含量不同有关,所以为了分析不同产地葶苈子脂溶性成分组成和含量的差异,本实验选择利用GC-MS对安徽产南葶苈子、河北产北葶苈子和延边产北葶苈子脂溶性成分进行测试。结果表明,不同产地葶苈子脂溶性成分组成和含量均有差异。从三个不同产地葶苈子的脂溶性成分中共鉴定得到70个化合物,安徽产、河北产和延边产的葶苈子中分别鉴定出34、32和43种脂溶性成分,这些化合物在三种产地中的含量均不同,其中亚麻酸甲酯的含量最多,且在延边产地的相对含量最高,可达到48.67%。所以推测作为朝药的一种,延边产北葶苈子可能有着更好的降血脂效果。
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