中药黄酮类化合物的提取分离及结构的电喷雾质谱(ESI-MS<'n>)研究

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中药是我国传统防治疾病的重要武器,我国劳动人民在与疾病作斗争的长期实践中,在辨认、采集、种植、炮制和使用中药方面积累了极为宝贵的经验。中草药化学成分较为复杂,所以想要研究和应用其中的有效成分,必须将它们从中药中提取出来并进一步加以分离和精制,得到有效单体。因此,中药化学成分的提取、分离和鉴定已日益成为中药现代化的重要研究方向。 本文采用乙酸乙酯/正丁醇/水=2∶1∶3的通用溶剂系统,通过改变溶剂系统,尝试不同溶剂系统的多种配比,应用高速逆流色谱成功分离了中草药葛根、野菊花、广藿香三种植物中的黄酮类有效活性成分,进一步验证了高速逆流色谱在分离植物有效活性成分方面的优越性。曹学丽等人以乙酸乙酯-正丁醇-水(2∶1∶3)从野葛根中分离异黄酮类物质,纯度均打到90%以上[3]。 应用ESI-MSn技术对中草药葛根、野菊花、广藿香中黄酮类成分进行了研究,实验通过TLC及HSCCC配合液相色谱技术,成功地鉴定了植物中的部分组分,包括:中药葛根中含大豆素-7、4′-二葡萄糖甙,7-木糖-葛根素,葛根素;广藿香中含3、5-二羟基-7、4′-二甲氧基黄酮,5-羟基-7、3′、4′-三甲氧基二氢黄酮,5、4′-二羟基-3、7、3′-三甲氧基黄酮和5-羟基-3、7、3′、4′-四羟基黄酮;北野菊中含5、7-二羟基-41-甲氧基黄酮,金合欢素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖基B(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖甙,金合欢素-7-O-α-L-吡喃鼠李糖(1-6)[2-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖(1-2)]-β-D-吡喃葡萄糖甙。由于质谱对药物分析的限制小,应用范围广,因此对于控制药物合成生产工艺及产品质量具有极为重要的意义。本研究建立了电喷雾质谱技术准确、快速分析中药植物中有效活性成分的有效方法。 构建了一种简单有效的中草药黄酮类化合物分析鉴定模式。利用直接进样的电喷雾离子阱质谱法,配合多级质谱的优势,取得各类中药植物中黄酮类化合物特定的指纹图谱,对特征的离子碎片进行分析对比,快速鉴定此类黄酮类提取物的组成结构。研究应用这个方法成功地确认了葛根、广藿香、北野菊提取物中含有的部分组分。研究表明该方法能快速得到天然药物中系列化合物的分子量信息,鉴别复杂化合物中单一化合物的组成,节省药物资源和分析时间。 首次采用电喷雾离子阱质谱技术,系统地研究了葛根中异黄酮,广藿香中黄酮、黄酮醇,及北野菊中黄酮,黄酮醇类化合物的电喷雾多级质谱特征,并详细地总结了各分离组分离子裂解的机理;进一步通过其多级质谱中特定碎片离子的特点,建立了黄酮类化合物的指纹图谱,并成功地用于对此类中草药粗提取产品中的黄酮类化合物的确认,且经HSCCC分离,ESI-MSn证明了其结构的正确性,为快速分析和鉴定黄酮类化合物及其类似物奠定了基础。
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