【摘 要】
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背景:众所周知,微小RNA(microRNA,miRNA)在肿瘤的发生发展过程中发挥了不可或缺的作用。多项研究表明,miR-3174在多种恶性肿瘤中起肿瘤启动子的作用。然而,miR-3174在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中对肿瘤生长的影响及其可能的作用机制仍然未被研究。方法:使用癌症基因组图谱(TCGA)和综合基因表达(GEO)数据库筛选出差异上调的mic
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背景:众所周知,微小RNA(microRNA,miRNA)在肿瘤的发生发展过程中发挥了不可或缺的作用。多项研究表明,miR-3174在多种恶性肿瘤中起肿瘤启动子的作用。然而,miR-3174在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中对肿瘤生长的影响及其可能的作用机制仍然未被研究。方法:使用癌症基因组图谱(TCGA)和综合基因表达(GEO)数据库筛选出差异上调的microRNAs。通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-3174在配对肝癌/癌旁组织和细胞系中的相对表达水平。分别使用细胞增殖实验、平板克隆、EdU增殖法和流式细胞术来检测敲低或过表达miR-3174的肝癌细胞的增殖能力。使用生物信息学分析结合荧光素酶报告基因实验的方法,将叉头框转录因子O1(Forkhead box O1,FOXO1)确认为miR-3174的直接靶点。在体内实验中通过构建裸鼠皮下成瘤模型来探究miR-3174对HCC发生发展的作用。结果:综合实验结果我们证实miR-3174在HCC组织与肝癌细胞系中表达水平均上调,miR-3174的表达高低与肿瘤大小和Edmondson分级高度相关。我们的研究证实了 miR-3174的表达水平上调在体内及体外均能促进肝癌细胞增殖,抑制肝癌细胞凋亡。miR-3174通过直接靶向FOXO1调控Bim、P21、cyclin D1和c-MYC等基因的表达。在功能回复实验中敲低FOXO1能够逆转miR-3174抑制剂诱导的细胞周期减慢,使细胞增殖能力加强。结论:研究证明HCC中过表达的miR-3174通过下调肝细胞肝癌中FOXO1的表达,提高了肝癌细胞增殖能力,同时抑制HCC细胞凋亡。miR-3174可能成为HCC患者靶向miRNA治疗的新候选靶点。
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