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目的:子宫内膜异位症发病机制目前仍不清楚,Sampson提出的“经血逆流内膜种植”学说能解释内异症大多数临床表现而广为接受,但Sampson学说始终不能解释为何90%以上妇女有经血逆流,但仅有10%的妇女发病?近年来,郎景和提出在位内膜的内在特性决定了逆流内膜在腹腔的“命运”,即种植形成异位病灶或逐渐死亡而被清除,逆流内膜经过3A模式(侵袭-粘附-血管形成)而在异位种植存活而形成异位病灶。而内膜在异位建立新的血供需48h-72,可见内膜进入腹腔早期(72h内)的组织活性是决定其能否在异位种植存活关键之一。但由于伦理学原因,不能在短期内对同一患者进行多次腹腔镜检查,逆流内膜在人体腹腔内的早期变化至今仍不清楚。人子宫内膜异位症裸鼠模型能很好地再现子宫内膜在光滑的腹膜种植的过程,且裸鼠遗传背景明确、稳定,不发生免疫排斥反应,复制率高,能保持人子宫内膜移植物固有的组织学形态和生物学特性。实验重复性强,专一性好,是建立人子宫内膜异位症的理想动物模型。而目前裸鼠EM模型的建立大多采用正常妇女非月经期子宫内膜,很少关注内异症妇女月经期自然脱落子宫内膜在腹腔的种植状态。本研究以T细胞免疫功能缺陷BALB/C(nu/nu)裸鼠为实验载体,通过不同方法采集的内异症妇女及正常妇女子宫内膜,建立“人子宫内膜异位症裸鼠模型”,探讨不同来源子宫内膜在裸鼠腹腔内的动态变化及其对裸鼠子宫内膜异位症模型建立的影响,为建立理想EMs动物模型提供依据,进一步揭示子宫内膜在腹膜的种植过程。方法:选择具备手术指征的内异症和非内异症(术后病理证实为子宫良性病变、子宫内膜正常)患者各24例,分别采集月经期自然脱落内膜、月经期刮取内膜以及术中刮取非月经期内膜分组。实验分两部分进行:第一部分:月经期子宫内膜在裸鼠腹腔内的动态变化。分别采集内异症及非内异症妇女月经期子宫内膜,每组各8位患者,采集脱落子宫内膜后腹腔注射法建立裸鼠子宫内膜异位症模型,于建模后24,48,72小时处死各组裸鼠,观察两组内膜进入腹腔后早期组织活性(HS)动态变化。第二部分:不同来源的内膜对人子宫内膜异位症裸鼠模型建立的影响。将两组各16名患者根据有无内异症及内膜采集方法分6组:内异症妇女月经期自然脱落内膜组(Endometriosis+shedding,EMsh),内异症妇女月经期刮取内膜组(Endometriosis+scoraping,EMsc),内异症妇女增生期刮取内膜组(Endometriosis+proliferative stage,EMpr);非内异症妇女(正常)月经期自然脱落内膜组(Normal+shedding,NOsh),非内异症妇女月经期刮取内膜组(Normal+scoraping,NOsc),非内异症妇女增生期刮取内膜组(Normal+proliferative stage,EMpr)。建模鼠根据内膜来源对应分为:EMsh、EMsc、EMpr、NOsh、NOsc、NOpr组。于内膜注射后第8天处死各组裸鼠,观察内膜的腹腔种植情况及各组建模成功率和病灶负荷情况,采集病灶并进行组织学分析。结果:第一部分:内膜腹腔注射后的第1天(d1),两组子宫内膜碎片大多游离于裸鼠腹腔内,组织水肿,体积略增大苍白,仅少数粘附于肠系膜、膀胱旁脂肪垫等处,但粘附不牢固,用吸取少量生理盐水的吸管轻轻吹打,碎片即可脱离;第2天(d2),组织仍水肿,苍白,两组均见少数子宫内膜碎片粘附于腹膜及子宫系膜等处,吸管吹打不易脱离;第3天(d3),游离内膜与粘附内膜共存,游离内膜表面仍苍白,体积缩小,萎缩状态,部分内膜牢固粘附与腹膜内,色泽鲜亮,周围可见稀疏新生血管形成(图2)。比较两组内膜腹腔注射前(0h)、注射后24h、48h、72h组织活性。发现两组月经期内膜均有不同程度损伤,腺体结构部分破坏,间质细胞减少,炎性细胞浸入,但内异症组内膜损伤程度相对较轻,而非内异症组相对较重,方差分析发现内异症组月经期内膜组织评分(HS)高于非内异症组(P<0.05)。内膜进入腹腔后随着时间推移内膜腺体结构破坏加重,间质细胞数量减少,溶解坏死细胞增多,重复测量方差分析,EMS组HS高于NOR组,差异显著(F=143.3,P=000);两组内膜注射后不同时间HS逐渐下降,差异显著(F=236.0,P=000)(图3)。第二部分:各组均有成功建模鼠,但各组建模成功率及病灶负荷不同。内异症各组与非内异症各组对应比较:卡方检验比较各组建模成功率:EMsh组与Nosh组相比,差异显著(卡方值=3.895,p=0.048);内异症组内相比,差异无显著性;正常内膜各组比较,差异无显著性。方差分析比较各组CSA:内异症组与正常组相比,EMsh组高于Nosh(p=0.006),EMsc组高于NOsc组(P=0.026);内异症组内相比,差异无显著性;正常内膜组内比较:NOpr组病灶负荷高于Nosh组(P=0.031);NOsc组病灶负荷高于Nosh组(P=0.018)。结论:结合以上几种情况的结果得出“月经期自然脱落内膜建立动物模型能很好地再现内异症妇女与非内异症妇女内膜在腹腔的种植差别”,是研究内异症发病机制的理想动物模型。