论文部分内容阅读
【背景】
胰腺癌是一种恶性程度极高、预后极差的消化系统肿瘤，被称为“癌中之王”，是威胁大众身体健康和生活质量的重要因素之一。该病发病隐匿，早期难以诊断且进展迅速，多数患者就诊时已为中晚期，其五年生存率约为8%。目前，外科手术仍是治疗胰腺癌的重要手段，但是只有10-15%的胰腺癌患者适合手术，对于大部分不能进行手术治疗的患者，化疗成为患者目前可供选择的主要治疗方式。随着靶向治疗等多种新兴治疗方式不断涌现，胰腺癌可供选择的治疗方案也不断增多。因此，寻找胰腺癌特异性靶分子用于胰腺癌治疗对于提高患者生存率和改善患者生存质量具有重要意义。
B细胞受体相关蛋白31(BCAP31)属于B细胞受体相关蛋白家族，是一种主要定位于内质网的蛋白，它参与多种蛋白质从内质网向高尔基体的顺向运输。除此之外，BCAP31还可以参与识别、降解错误折叠蛋白及细胞凋亡过程。本课题组前期利用独创的生精细胞特异性单克隆抗体筛选肿瘤/睾丸抗原的方法，结合免疫沉淀-质谱分析发现BCAP31可能是一个新的肿瘤/睾丸抗原。且近年来不断有研究报道BCAP31在多种肿瘤如肝癌、结直肠癌、宫颈癌、非小细胞肺癌中高表达，并参与调节多种肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，可作为肿瘤治疗的潜在靶点。但BCAP31在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌的恶性生物学行为的影响及作用机制尚不明确。
【目的】
1.分析BCAP31在胰腺癌组织中的表达水平及其与病人临床病理参数的关系。
2.明确BCAP31对胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。
3.初步阐明BCAP31影响胰腺癌细胞恶性生物学行为的机制。
【方法】
1.利用免疫组织化学染色检测BCAP31在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达情况，分析其与患者年龄、性别、病理分级等临床病理参数的相关性。
2.通过慢病毒构建下调BCAP31的胰腺癌细胞系及其对照细胞系。
3.利用CCK-8实验、平板克隆形成实验、流式细胞术检测细胞周期实验检测下调BCAP31后胰腺癌细胞的增殖能力和细胞周期变化。
4.利用划痕实验、Transwell迁移实验检测下调BCAP31后胰腺癌细胞的迁移能力变化。
5.利用Transwell侵袭实验检测下调BCAP31后胰腺癌细胞侵袭能力的变化。
6.利用Westernblot实验初步探究BCAP31影响胰腺癌恶性生物学行为的机制。
【结果】
1.免疫组化染色结果显示BCAP31在胰腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织，且BCAP31的表达水平与胰腺癌患者的病理分级相关。
2.利用慢病毒构建下调BCAP31的胰腺癌细胞系ASPC-1SH和BXPC-3SH及其对照细胞系ASPC-1SN和BXPC-3SN，Westernblot实验显示在胰腺癌细胞系ASPC-1、BXPC-3中成功下调BCAP31的蛋白表达水平。
3.CCK-8实验、平板克隆实验及流式细胞术实验结果显示，下调BCAP31的表达水平后，胰腺癌细胞ASPC-1和BXPC-3的增殖能力受到抑制。
4.划痕实验、Transwell迁移实验结果显示：下调BCAP31的表达水平后，胰腺癌细胞迁移能力受到抑制。
5.Transwell侵袭实验结果发现：下调BCAP31的表达水平后，胰腺癌细胞的侵袭能力受到抑制。
6.Westernblot实验结果显示：BCAP31可以调节细胞周期蛋白CyclinE及侵袭迁移相关蛋白Drebrin的表达水平，提示BCAP31可能通过调控CyclinE、Drebrin的表达来调节胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
【结论】
我们通过本研究首次明确了BCAP31在胰腺癌发生发展中的作用，发现了BCAP31对胰腺癌增殖、侵袭和迁移等恶性生物学行为的影响及其机制，进一步丰富了胰腺癌发生发展的研究，为胰腺癌靶向BCAP31的治疗策略提供了新的理论依据。
胰腺癌是一种恶性程度极高、预后极差的消化系统肿瘤，被称为“癌中之王”，是威胁大众身体健康和生活质量的重要因素之一。该病发病隐匿，早期难以诊断且进展迅速，多数患者就诊时已为中晚期，其五年生存率约为8%。目前，外科手术仍是治疗胰腺癌的重要手段，但是只有10-15%的胰腺癌患者适合手术，对于大部分不能进行手术治疗的患者，化疗成为患者目前可供选择的主要治疗方式。随着靶向治疗等多种新兴治疗方式不断涌现，胰腺癌可供选择的治疗方案也不断增多。因此，寻找胰腺癌特异性靶分子用于胰腺癌治疗对于提高患者生存率和改善患者生存质量具有重要意义。
B细胞受体相关蛋白31(BCAP31)属于B细胞受体相关蛋白家族，是一种主要定位于内质网的蛋白，它参与多种蛋白质从内质网向高尔基体的顺向运输。除此之外，BCAP31还可以参与识别、降解错误折叠蛋白及细胞凋亡过程。本课题组前期利用独创的生精细胞特异性单克隆抗体筛选肿瘤/睾丸抗原的方法，结合免疫沉淀-质谱分析发现BCAP31可能是一个新的肿瘤/睾丸抗原。且近年来不断有研究报道BCAP31在多种肿瘤如肝癌、结直肠癌、宫颈癌、非小细胞肺癌中高表达，并参与调节多种肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，可作为肿瘤治疗的潜在靶点。但BCAP31在胰腺癌中的表达及其对胰腺癌的恶性生物学行为的影响及作用机制尚不明确。
【目的】
1.分析BCAP31在胰腺癌组织中的表达水平及其与病人临床病理参数的关系。
2.明确BCAP31对胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。
3.初步阐明BCAP31影响胰腺癌细胞恶性生物学行为的机制。
【方法】
1.利用免疫组织化学染色检测BCAP31在胰腺癌组织及癌旁组织中的表达情况，分析其与患者年龄、性别、病理分级等临床病理参数的相关性。
2.通过慢病毒构建下调BCAP31的胰腺癌细胞系及其对照细胞系。
3.利用CCK-8实验、平板克隆形成实验、流式细胞术检测细胞周期实验检测下调BCAP31后胰腺癌细胞的增殖能力和细胞周期变化。
4.利用划痕实验、Transwell迁移实验检测下调BCAP31后胰腺癌细胞的迁移能力变化。
5.利用Transwell侵袭实验检测下调BCAP31后胰腺癌细胞侵袭能力的变化。
6.利用Westernblot实验初步探究BCAP31影响胰腺癌恶性生物学行为的机制。
【结果】
1.免疫组化染色结果显示BCAP31在胰腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织，且BCAP31的表达水平与胰腺癌患者的病理分级相关。
2.利用慢病毒构建下调BCAP31的胰腺癌细胞系ASPC-1SH和BXPC-3SH及其对照细胞系ASPC-1SN和BXPC-3SN，Westernblot实验显示在胰腺癌细胞系ASPC-1、BXPC-3中成功下调BCAP31的蛋白表达水平。
3.CCK-8实验、平板克隆实验及流式细胞术实验结果显示，下调BCAP31的表达水平后，胰腺癌细胞ASPC-1和BXPC-3的增殖能力受到抑制。
4.划痕实验、Transwell迁移实验结果显示：下调BCAP31的表达水平后，胰腺癌细胞迁移能力受到抑制。
5.Transwell侵袭实验结果发现：下调BCAP31的表达水平后，胰腺癌细胞的侵袭能力受到抑制。
6.Westernblot实验结果显示：BCAP31可以调节细胞周期蛋白CyclinE及侵袭迁移相关蛋白Drebrin的表达水平，提示BCAP31可能通过调控CyclinE、Drebrin的表达来调节胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
【结论】
我们通过本研究首次明确了BCAP31在胰腺癌发生发展中的作用，发现了BCAP31对胰腺癌增殖、侵袭和迁移等恶性生物学行为的影响及其机制，进一步丰富了胰腺癌发生发展的研究，为胰腺癌靶向BCAP31的治疗策略提供了新的理论依据。